Western一抗二抗去除液(Stripping buffer),用于Western中转移了蛋白的膜的重复利用。在Western中完成了一抗二抗结合和后续的化学发光检测后,有时还需要检测tubulin、actin等表达量相对稳定的蛋白作为参照,或检测其它蛋白进行比较。通过使用一抗二抗去除液,充分去除一抗二抗,可以非常方便地重新利用使用过的膜检测其它蛋白。和重新跑一个SDS-PAGE胶相比,不仅省时省力,而且可以消除重新上样而带来的误差,使可比性更强。
使用Western一抗二抗去除液多次重复使用同一张膜,会导致蛋白信号的减弱。但是,本Western一抗二抗去除液,经过多个抗体的检测试验,通常可以重复利用膜3-5次。
使用本试剂只需大约40-80分钟即可实现蛋白膜的重复使用,然后可以进行封闭等后续的Western操作。
碧云天生产的不同的Western一抗二抗去除液主要在去除结合的一抗二抗的原理方面略有不同。分别依靠去垢剂、酸性、碱性、还原剂、螯合剂、盐浓度以及一些特殊试剂等的不同组合来解除一抗二抗的结合,同时又不会导致转移到膜上的蛋白的损失。
关于Western一抗二抗去除液的选择,一方面可以参考碧云天的相关网页:
http://www.beyotime.com/support/stripping-buffer.htm;另一方面也需要通过一些预实验来摸索最佳的适合您实验条件
的Western一抗二抗去除液。
包装清单:
产品编号
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产品名称
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包装
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P0025S
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Western一抗二抗去除液(酸性)
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125ml/瓶,共2瓶
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说明书
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1份
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保存条件:
室温保存,一年有效。
注意事项:
使用辣根过氧化物酶(HRP),任何一次封闭(blocking)都应当使用5%脱脂牛奶,如果使用碱性磷酸酯酶,任何一次封闭都应当使用酪蛋白(casein)。
为取得最佳效果,推荐使用PVDF膜。但硝酸纤维素膜也可以使用本Western一抗二抗去除液。
使用ECL、BeyoECL等类似的化学发光试剂进行的Western检测适用本试剂。使用非化学发光试剂进行的Western检测,例如DAB,NBT/BCIP,不适用于本试剂。
本Western一抗二抗去除液有轻微腐蚀性,使用时请注意防护。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。