简介

DAF-FM DA 即 3-Amino,4-aminomethyl-2’,7’-difluorescein,diacetate，也称 DAF-FM diacetate 或 4-Amino,5-aminomethyl- 2’,7’- difluorescein, diacetate。 DAF-FM DA 是最新一代用于一氧化氮定量检测的荧光探针，比以前比较常用的一氧化氮荧光检测探针 DAF-2 diacetate 有多方面的改进。首先，DAF-FM DA 和 DAF-2 diacetate 相比，最后和一氧化氮反应形成的荧光产物受 pH 值的影 响小，在 pH 值大于 5.5 时不受 pH 值的影响。其次，DAF-FM DA 和 DAF-2 diacetate 相比，前者产生的荧光更加稳定，不容易淬灭，这样更加便于检测。另外，DAF-FM DA 和 DAF-2 diacetate 相比，前者对一氧化氮的检测灵敏度更高，相同条件下检测灵敏度可以 提高接近 2 倍，最低检测浓度可以达到 3nM。 DAF-FM DA 可以穿过细胞膜(cell-permeable)，进入细胞后可以被细 胞内的酯酶催化形成不能穿过细胞膜的 DAF-FM 。DAF-FM 本身仅有很弱的荧光，但在和一氧化氮反应后可以产生强烈荧光，激发波长为 495nm，发射波长为 515nm。DAF-FM DA 检测一氧化氮的机制可以参考上图。任何可以检测 fluorescein 的仪器，包括荧光显微镜、激光共聚焦显微镜、流式细胞仪、荧光分光光度计或荧光酶标仪都可以用于该荧光探针的检测。右图为 DAF-FM 在不同浓度一氧化氮存在时的发射荧光扫描图谱(fluorescence emissionspectra)。 DAF-FM DA 的分子量为 496.4，分子式为 C25H18F2N2O7，HPLC 分析纯度大于 98%。本 DAF-FM DA 为溶解于 DMSO的淡黄色溶液，浓度为 5mM。 本荧光探针适合于检测细胞内的一氧化氮水平，可以进行实时检测。如果收集细胞后再装载探针，通常至少可以检测 100 个样品。

技术参数

实验类型：一氧化氮水平检测
检测方法：荧光成像、荧光酶标仪或流式细胞仪检测
保存条件:-20℃，保存6个月，避光

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