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天根生化pGM-T Fast克隆试剂盒/... 当商品进行补货时,我们将以短信、邮件的形式通知您,最多发送一次,不会对您造成干扰。 |
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pGM-T Fast Vector 是基于pGM-T Vector改良的一种高效克隆PCR产物的专用载体,经由克隆质粒在XcmI内切酶酶切后得到的带3’ T突出末端的线性化载体,通过该方法产生的带有3’ T突出末端的线性化载体效率远高于传统酶切加尾法。由于大部分耐热聚合酶反应时都会在PCR产物的3’端添加一个A,可与pGM Simple -T Fast Vector 3’端的T互补连接。此外,pGM-Simple-T Fast Vector突变掉pGM-T Vector的多克隆位点,以方便自行引入酶切位点。
试剂盒中配备了新型的RapiLigation Mix(目录号:RT407)为高效的T4 DNA连接酶反应试剂,其中含有连接增强剂、酶稳定剂,可大大缩短连接时间、提高PCR产物的连接和克隆效率。按不同需要配备了DH5感受态细胞以及对照用超螺旋质粒,方便进行转化。带有插入片段的重组子可根据α互补原理,进行蓝白斑筛选,判断载体中有无外源基因的插入(白色克隆为阳性重组克隆,蓝色的为载体自连的克隆,具体筛选原理参考分子克隆等书籍)。克隆后,可使用通用引物T7、SP6进行鉴定和测序。
高效快速: 5min快速连接,阳性率近100%。
灵敏广泛:适合低至0.025 pmol浓度片段和长至8 kb片段的高效连接。
无多克隆位点: 载体自身无多克隆位点,方便自行引入酶切位点。
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