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碧云天 G6P检测试剂盒(WST-8法)(S0185)

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  • 商品名称:碧云天 G6P检测试剂盒(WST-8法)(S0185)
  • 商品编号:S0185
  • 品牌:碧云天
  • 上架时间:2019-09-09
  • 商品毛重:100克
  • 库存: 65535
  • 详细参数>>
产品编号 产品名称 产品包装 产品价格
S0185 G6P检测试剂盒(WST-8法) 100次 1418.00元

碧云天的G6P检测试剂盒(WST-8法) (G6P Assay Kit with WST-8)是一种高灵敏度的基于WST-8的显色反应,通过比色法来检测细胞、组织或其它样品中G6P含量的检测试剂盒。
WST-8是MTT的一种升级替代产品,和MTT或其他MTT类似产品如XTT、MTS等相比有明显的优点。首先,MTT被一些脱氢酶还原生成的formazan不是水溶性的,需要有特定的溶解液来溶解;而WST-8和XTT、MTS产生的formazan都是水溶性的,可以省去后续的溶解步骤。其次,WST-8产生的formazan比XTT和MTS产生的formazan更易溶解。再次,WST-8比XTT和MTS更加稳定,使实验结果更加稳定。另外,WST-8和MTT、XTT等相比,线性范围更宽,灵敏度更高。WST-8和WST-1相比,检测灵敏度更高,更易溶解,并且更加稳定。
本试剂盒使用便捷。使用细胞、组织等的裂解液即可进行检测,无需分离纯化细胞、组织或其它样品中的G6P。
本试剂盒检测灵敏度高,线性范围宽。可以检测含量低至20μM (1nmol)的G6P,在20μM (1nmol)至500μM (25nmol)之间呈现良好的线性关系。
G6P (Glucose-6-phosphate,葡萄糖-6-磷酸,又称6-磷酸葡萄糖)是葡萄糖的第6位碳上的羟基在己糖激酶催化下发生磷酸化后生成的分子,是细胞中常见的糖代谢小分子,参与糖酵解(glycolytic pathway)和磷酸戊糖(pentose phosphate pathway)等生化途径。在糖酵解的第一步反应中,葡萄糖被己糖激酶催化生成葡萄糖-6-磷酸,然后通过磷酸葡萄糖异构酶的催化形成果糖-6-磷酸,以继续糖酵解的其它步骤;而在戊糖磷酸途径中,葡萄糖-6-磷酸是其第一个底物,该过程也是生成NADPH的主要途径。除了这两个代谢途径外,葡萄糖-6-磷酸也能转化形成糖原或淀粉而被存储起来。
本试剂盒可检测样品中的G6P含量,具体原理如下:葡萄糖-6-磷酸(G6P)在葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(glucose-6-phosphate dehydrogenase, G6PDH)的作用下氧化生成6-磷酸葡萄糖酸内酯(6-phosphogluconate, 6-PG),在这一反应过程中NADP+被还原为NADPH,生成的NADPH在电子耦合试剂1-mPMS (1-Methoxy-5-methylphenazinium Methyl Sulfate)的作用下将WST-8还原生成橙黄色的formazan,在450nm左右有最大吸收峰。反应体系中生成的formazan与样品中总的G6P的量呈正比关系。WST-8法检测G6P的原理参考图1。

图1.WST-8法检测G6P的原理图。

本试剂盒适用于检测细胞、组织以及其它适当样品中G6P的含量。
本试剂盒可以测定100个样品。

包装清单:
产品编号 产品名称 包装
S0185-1 酶混合液 220μl
S0185-2 G6P标准品(10mM) 100μl
S0185-3 显色液 220μl
S0185-4 反应缓冲液 5.5ml
S0185-5 G6P提取液 50ml
说明书 1份

保存条件:
-20℃保存,一年有效。显色液(S0185-3)须-20℃避光保存。
注意事项:
经检测本试剂盒中的酶混合液室温存放72小时或反复冻融5次不影响其酶活性。
由于G6P提取液略显粘稠,以该提取液作为稀释液时,无论对标准品还是样品进行稀释,在稀释过程中务必确保稀释均匀,否则易造成实验数据产生较大波动。
在样品加样和混匀过程中,须尽量避免产生气泡,以免影响最终的吸光度测定。
如果不能非常严格地控制反应温度和反应时间,每次检测都需要设置标准曲线。
如果样品溶液中G6P浓度过高或过低,不在试剂盒的线性检测范围内时,可适当调整样品或者提取液的用量。
尽量使用新鲜样品进行检测,冻存或反复冻融的细胞或组织样品可能对结果有一定影响。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

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