碧云天生产的EPI300甘油菌(EPI300 Glycerol Stock)，是收集生长在对数期的EPI300甘油菌，加入含有甘油的细菌冻存液制备而成。本甘油菌可以直接划平板或小量、大量培养。

EPI300细胞含有一个突变的trfA基因，该基因表达的蛋白产物可以促进含有ori V复制子的质粒的高拷贝复制，在非诱导情况下，当含有oriV复制子质粒的EPI300菌株在LB/2YT或SOB培养基中生长时，trfA基因的表达被抑制，oriV复制子质粒的拷贝数维持在很低的水平；当在培养基中加入诱导剂，例如碧云天的CopyCutter Induction Solution (200X) (D0356)后，oriV复制子质粒的拷贝数可维持在很高的水平，进而提高了质粒产量。因此EPI300菌株可以降低oriV复制子质粒的拷贝数，特别适合于各种不稳定DNA或毒性基因的克隆。[mrr-hsdRMS-mcrBC]基因型使EPI300菌株适合于克隆富含甲基胞嘧啶或甲基腺嘌呤的DNA (例如哺乳动物基因组DNA等)。recA1和endA1的突变有利于插入DNA的稳定和高纯度质粒DNA的提取。

lacZΔM15 标记的存在使EPI300可用于蓝白斑筛选，rpsL赋予其链霉素抗性。

EPI300菌株基因型：F–mcrA ∆(mrr-hsdRMS-mcrBC) φ80dlacZ∆M15 ∆lacX74 recA1 endA1 araD139 ∆(ara,leu)7697 galU galK λ–rpsL nupG trfA dhfr

本菌株可以使用常规的2YT/LB或SOB培养基进行培养。

-20℃保存，至少3个月有效。-80℃保存至少2年有效。尽量避免反复冻融。

使用本甘油菌时可以不必完全融解，在甘油菌表面蘸取少量涂板或进行液体培养即可。也可以完全融解后使用，但随着冻融次数的增加细菌的活力会逐渐下降。在没有结冻的情况下，菌体会逐渐沉淀至管底，请务必注意适当混匀后使用。

为保证菌种纯正，避免其它细菌污染，尽量先划平板然后再挑单克隆菌落进行后续操作。

本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。

为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。