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| 产品编号 | 产品名称 | 产品包装 | 产品价格 |
| D3002-1μg | pET-N-His-Avi (Avi标签原核表达质粒) | 1μg | 888.00元 |
| D3002-100μg | pET-N-His-Avi (Avi标签原核表达质粒) | 100μg | 1169.00元 |
pET-N-His-Avi是碧云天自行研发的用于在大肠杆菌(E.coli)中表达可被生物素标记的目的蛋白的原核表达质粒。该质粒在多克隆位点(Multiple cloning sites, MCS)之前含有His标签(His tag)和Avi标签(Avi tag)，目的蛋白表达后在ATP、生物素(Biotin)以及生物素连接酶(Biotin ligase) BirA存在的体外条件下，BirA催化生物素共价结合到目的蛋白N端的Avi标签上，从而对目的蛋白进行生物素标记。本质粒为卡那霉素(Kanamycin)抗性。
Avi标签是由15个氨基酸(GLNDIFEAQKIEWHE)组成的短肽标签，在ATP和生物素存在的条件下，BirA可以在Avi标签的赖氨酸残基上连接一个生物素，从而实现目的蛋白的生物素标记[1]。
生物素连接酶BirA特异性生物素标记Avi-tag有多方面的优点。Avi标签小且对融合蛋白的影响非常小，只针对Avi标签上的Lys残基进行特定位置的生物素标记，生物素标记效率高，可重复性好；体内或体外均可进行标记，标记后的蛋白与链霉亲和素(Streptavidin)的亲和力高，从而使Avi-tag技术可以应用于目的蛋白的固定吸附、纯化和检测等；相比于传统生物素化学标记的非特异性位点的标记，BirA催化的反应条件更温和，对被标记蛋白活力影响小，酶活效率高，标记特异性强[1]。
本质粒表达的目的蛋白可以采用如BeyoGold™ His-tag Purification Resin (耐还原螯合型) (P2210/P2218/P2220)、His标签蛋白纯化试剂盒(耐还原螯合型) (P2226)以及BeyoGold™ His-tag Purification Resin (耐变性剂型) (P2233)、His标签蛋白纯化试剂盒(耐变性剂型) (P2229S)等进行纯化。
pET-N-His-Avi质粒的主要信息如下：
| Feature Nucleotide | Position |
| f1 ori | 12-467 |
| Kanamycin | 560-1375 |
| ori | 1467-2085 |
| bom | 2271-2413 |
| rop | 2515-2706 |
| lacI | 3515-4597 |
| T7 promoter | 4984-5002 |
| lac operater | 5003-5027 |
| His tag | 5077-5094 |
| Avi tag | 5101-5145 |
| Multiple cloning site | 5164-5197 |
| His tag | 5198-5215 |
| T7 terminator | 5282-5329 |
pET-N-His-Avi质粒(5354bp)的图谱如下：
pET-N-His-Avi表达基因的详细图谱见说明书：https://www.beyotime.com/Manual/D3002 pET-N-His-Avi (Avi标签原核表达质粒).pdf。
pET-N-His-Avi中没有的酶切位点包括：
| AarI | AatI | AatII | AbsI | Acc36I | Acc65I | Acc113I |
| AcvI | AflII | AgeI | AhdI | AhlI | AjiI | AleI |
| AscI | AsiGI | Asp718I | AspA2I | AspEI | AsuII | AsuNHI |
| AvrII | AxyI | BaeI | BalI | BbrPI | BbvCI | BcuI |
| BfrI | BfuAI | BlnI | BmcAI | BmeRI | BmgBI | BmtI |
| BplI | Bpu14I | BsaI | Bse21I | BseRI | BshTI | BsiWI |
| Bso31I | Bsp119I | Bsp1407I | BspMI | BspOI | BspTI | BspT104I |
| BspTNI | BsrGI | Bst98I | BstAFI | BstAUI | BstBI | BstSNI |
| Bsu36I | BtrI | BveI | Cfr42I | CpoI | CsiI | CspI |
| Csp45I | CspAI | CspCI | DraI | DriI | Eam1105I | Eco31I |
| Eco72I | Eco81I | Eco105I | Eco147I | FalI | FauNDI | FseI |
| I-CeuI | I-PpoI | I-SceI | KflI | KpnI | KspI | MabI |
| MauBI | MfeI | MlsI | MluNI | MreI | MscI | Msp20I |
| MspCI | MssI | MunI | Nb.BbvCI | NdeI | NheI | NspV |
| Nt.BbvCI | OliI | PacI | PalAI | PasI | PceI | Pfl23II |
| PI-PspI | PI-SceI | PinAI | PmaCI | PmeI | PmlI | PspCI |
| PspLI | PsrI | PstI | RigI | RsrII | Rsr2I | SacII |
| SanDI | SbfI | ScaI | SdaI | SexAI | SfiI | Sfr303I |
| SfuI | SgrBI | SgrDI | SgsI | SmiI | SnaBI | SpeI |
| SrfI | Sse8387I | SseBI | SspBI | SstII | StuI | SwaI |
| Vha464I | XmaJI | ZraI | ZrmI |
pET-N-His-Avi中的单酶切位点包括：
| AlwNI | CAG,NNN`CTG | 1732 | NcoI | C`CATG,G | 5069 |
| ApaI | G,GGCC`C | 4039 | NmeAIII | GCCGAG(N)19,NN` | 4042 |
| AsiSI | GCG,AT`CGC | 945 | NotI | GC`GGCC,GC | 5184 |
| BamHI | G`GATC,C | 5152 | NruI | TCG|CGA | 1286 |
| BclI | T`GATC,A | 4228 | PaeR7I | C`TCGA,G | 5192 |
| BglI | GCCN,NNN`NGGC | 3185 | PciI | A`CATG,T | 2141 |
| BglII | A`GATC,T | 4964 | PflFI | GACN`N,NGTC | 2399 |
| BlpI | GC`TNA,GC | 5271 | PpuMI | RG`GWC,CY | 3136 |
| BspDI | AT`CG,AT | 1250 | PshAI | GACNN|NNGTC | 3401 |
| BspQI | GCTCTTCN`NNN, | 2258 | PsiI | TTA|TAA | 370 |
| BssHII | G`CGCG,C | 3831 | PspOMI | G`GGCC,C | 4035 |
| BstAPI | GCAN,NNN`NTGC | 4566 | PspXI | VC`TCGA,GB | 5192 |
| BstEII | G`GTNAC,C | 4060 | PvuI | CG,AT`CG | 945 |
| BstZ17I | GTA|TAC | 2374 | SacI | G,AGCT`C | 5168 |
| ClaI | AT`CG,AT | 1250 | SalI | G`TCGA,C | 5171 |
| DraIII | CAC,NNN`GTG | 245 | SapI | GCTCTTCN`NNN, | 2258 |
| EagI | C`GGCC,G | 5184 | SgrAI | CR`CCGG,YG | 4923 |
| Eco53kI | GAG|CTC | 5166 | SmaI | CCC|GGG | 1069 |
| EcoRI | G`AATT,C | 5158 | SphI | G,CATG`C | 4775 |
| EcoRV | GAT|ATC | 3796 | TspMI | C`CCGG,G | 1067 |
| FspI | TGC|GCA | 3164 | Tth111I | GACN`N,NGTC | 2399 |
| HindIII | A`AGCT,T | 5177 | XbaI | T`CTAG,A | 5030 |
| HpaI | GTT|AAC | 3740 | XhoI | C`TCGA,G | 5192 |
| MluI | A`CGCG,T | 4242 | XmaI | C`CCGG,G | 1067 |
pET-N-His-Avi质粒中推荐使用的测序引物序列如下： T7-R (4984-5003): 5'-CCCTATAGTGAGTCGTATTA-3'
pET-N-His-Avi的全序列信息：D3002 pET-N-His-Avi (Avi标签原核表达质粒)全序列.txt
包装清单：| 产品编号 | 产品名称 | 包装 |
| D3002-1µg | pET-N-His-Avi | 1µg |
| D3002-100µg | pET-N-His-Avi | 100µg |
| — | 说明书 | 1份 |
-20℃保存。
注意事项：本质粒未经碧云天书面许可不得用于任何商业用途，也不得移交给订货人所在实验室外的任何个人或单位。
本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
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