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| 产品编号 | 产品名称 | 产品包装 | 产品价格 |
| D2771-1μg | pCMV-N-Flag-Bla | 1μg | 888.00元 |
| D2771-100μg | pCMV-N-Flag-Bla | 100μg | 1169.00元 |
pCMV-N-Flag-Bla是碧云天自行研发的用于在哺乳动物细胞中表达N端带有Flag标签(Flag Tag，DYKDDDDK)的目的蛋白的表达质粒。该质粒含有CMV启动子可以高效启动目的蛋白在细胞中的表达；在多克隆位点的5′端含有一个编码Flag标签的序列，可以表达带有Flag标签的融合蛋白，因此可以方便地利用抗Flag的抗体来识别目的蛋白，从而有利于目的蛋白检测和分离纯化。
pCMV-N-Flag-Bla质粒为氨苄青霉素抗性和灭瘟素S (Blasticidin S)抗性，可利用其氨苄青霉素抗性转化大肠杆菌后筛选阳性菌；而在转染哺乳动物细胞后，可利用其Blasticidin S抗性筛选稳定表达目的蛋白的细胞株。Blasticidin S (ST018)可以从碧云天购买。
Blasticidin S是来源于灰色链霉菌(Streptomyces griseochromogenes)的一种核苷类抗生素，中文名为灭瘟素S、杀稻瘟菌素S或稻瘟散。Blasticidin S特异性地抑制原核细胞或真核细胞的蛋白质合成，从而杀死细胞。Blasticidin S抗性基因(bsr/BSD/bls)所编码的Blasticidin S脱氨酶可以催化Blasticidin S发生脱氨基反应生成对细胞无毒性的Blasticidin S脱氨羟基化衍生物，从而使细胞对Blasticidin S产生抗性。因此，Blasticidin S可用于筛选携带bsr/BSD/bls基因(常标记为bsrr/bsdr/Blastr)质粒的哺乳动物稳定转染细胞株，也可用于大肠杆菌等原核细胞的筛选。
Blasticidin S具有快速而强效的作用模式，通常可在不到一周的时间内即可筛选到具有Blasticidin S抗性的稳定哺乳动物细胞系。工作浓度范围1-50μg/ml，通常建议使用10μg/ml的浓度进行稳定哺乳动物细胞株的筛选，实际使用时应针对不同的细胞系测试Blasticidin S的浓度梯度，以确定最佳使用浓度。
pCMV-N-Flag-Bla质粒(4959bp)的图谱如下：
pCMV-N-Flag-Bla质粒的主要信息如下：
| Feature Nucleotide | Position |
| Ampicillin resistance ORF | 63-923 |
| CMV promoter | 1405-1608 |
| T3 promoter and T3 primer binding site | 1654-1672 |
| Flag tag | 1713-1736 |
| Multiple cloning site (XmaI-ApaI) | 1739-1811 |
| T7 promoter and T7 primer binding site | 1857-1875 |
| SV40 polyA signal | 2149-2270 |
| f1 origin of ss-DNA replication | 2277-2732 |
| SV40 promoter | 2865-3222 |
| Blasticidin resistance ORF | 3257-3655 |
| HSV-thymidine kinase (TK) polyA signal | 3887-3934 |
| pUC origin | 4263-4851 |
pCMV-N-Flag-Bla的多克隆位点的详细图谱见说明书：https://www.beyotime.com/Manual/D2771 pCMV-N-Flag-Bla.pdf
pCMV-N-Flag-Bla中没有的酶切位点(Restriction enzymes that do not cut pCMV-N-Flag-Bla)包括：
| Afe I | Afl II | Age I | Asc I | AsiS I | Bae I |
| BbvC I | BmgB I | Bpu10 I | BsiW I | BsmB I | BspE I |
| BspQ I | BsrG I | BssH II | BstE II | BstZ17 I | EcoN I |
| Esp3 I | Fse I | Kas I | Nar I | PflF I | PflM I |
| PluT I | Pme I | Pml I | PshA I | PspX I | Rsrl I |
| Sap I | Sbf I | Sfo I | SgrA I | Swa I | Tth111 I |
| Xcm I |
pCMV-N-Flag-Bla中的单酶切位点(Restriction enzymes that cut pCMV-N-Flag-Bla once)包括：
| AccI | GT`MK,AC | 1777 | MfeI | C`AATT,G | 2135 |
| AhdI | GACNN,N`NNGTC | 135 | MluI | A`CGCG,T | 2271 |
| AleI | CACNN|NNGTG | 1695 | MscI | TGG|CCA | 3260 |
| ApaI | G,GGCC`C | 1806 | NdeI | CA`TA,TG | 1274 |
| BamHI | G`GATC,C | 1746 | NheI | G`CTAG,C | 1631 |
| BbsI | GAAGACNN`NNNN, | 3342 | NotI | GC`GGCC,GC | 1702 |
| BcgI | NN`(N)10CGA(N)6TGC(N)10,NN` | 639 | NruI | TCG|CGA | 3488 |
| BclI | T`GATC,A | 2042 | PaeR7I | C`TCGA,G | 1788 |
| BfuAI | ACCTGCNNNN`NNNN, | 3707 | PciI | A`CATG,T | 4907 |
| BglII | A`GATC,T | 1782 | PpuMI | RG`GWC,CY | 3416 |
| BlpI | GC`TNA,GC | 3652 | PspOMI | G`GGCC,C | 1806 |
| BmtI | G,CTAG`C | 1631 | PstI | C,TGCA`G | 1758 |
| BsaXI | NNN`(N)9AC(N)5CTCC(N)7,NNN` | 2432 | SacI | G,AGCT`C | 1685 |
| BseRI | GAGGAG(N)8,NN` | 3201 | SacII | CC,GC`GG | 1694 |
| BsgI | GTGCAG(N)14,NN` | 3442 | SalI | G`TCGA,C | 1776 |
| BspDI | AT`CG,AT | 3225 | ScaI | AGT|ACT | 616 |
| BspMI | ACCTGCNNNN`NNNN, | 3707 | SfiI | GGCCN,NNN`NGGCC | 3157 |
| BstBI | TT`CG,AA | 3671 | SmaI | CCC|GGG | 1741 |
| BstXI | CCAN,NNNN`NTGG | 1693 | SnaBI | TAC|GTA | 1380 |
| ClaI | AT`CG,AT | 3225 | SpeI | A`CTAG,T | 1800 |
| DraIII | CAC,NNN`GTG | 2498 | SrfI | GCCC|GGGC | 1741 |
| EarI | CTCTTCN`NNN, | 931 | StuI | AGG|CCT | 3206 |
| Eco53kI | GAG|CTC | 1687 | TspMI | C`CCGG,G | 1739 |
| EcoRI | G`AATT,C | 1764 | XbaI | T`CTAG,A | 1794 |
| EcoRV | GAT|ATC | 1772 | XhoI | C`TCGA,G | 1788 |
| HindIII | A`AGCT,T | 1752 | XmaI | C`CCGG,G | 1739 |
| HpaI | GTT|AAC | 2148 | XmnI | GAANN|NNTTC | 735 |
pCMV-N-Flag-Bla质粒中对插入片段进行测序时，推荐使用的正向测序引物T3和反向测序引物T7的序列如下：
T3 primer (1654-1672): 5' AATTAACCCTCACTAAAGG 3'
T7 primer (1857-1875): 5' TAATACGACTCACTATAGG 3'
pCMV-N-Flag-Bla的全序列信息:D2771 pCMV-N-Flag-Bla-seq.txt
不同真核表达质粒的比较和选择，以及标签和抗性的考虑可以参考如下网页：
https://www.beyotime.com/goods.do?method=lcode&lcode=001001001004
包装清单：| 产品编号 | 产品名称 | 包装 |
| D2771-1μg | pCMV-N-Flag-Bla | 1μg |
| D2771-100μg | pCMV-N-Flag-Bla | 100μg |
| － | 说明书 | 1份 |
-20℃保存。
注意事项：本质粒未经碧云天书面许可不得用于任何商业用途，也不得移交给订货人所在实验室外的任何个人或单位。
本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
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