pCMV-C-HA-Bla是碧云天自行研发的用于在哺乳动物细胞中表达C端带有HA标签(HA Tag)的目的蛋白的表达质粒。该质粒含有CMV启动子可以高效启动目的蛋白在细胞中的表达；在多克隆位点的3′端含有一个编码HA标签的序列，可以表达带有HA标签的融合蛋白，因此可以方便地利用抗HA的抗体来识别目的蛋白，从而有利于目的蛋白检测和分离纯化。

pCMV-C-HA-Bla质粒为氨苄青霉素抗性和灭瘟素S (Blasticidin S)抗性，可利用其氨苄青霉素抗性转化大肠杆菌后筛选阳性菌；而在转染哺乳动物细胞后，可利用其Blasticidin S抗性筛选稳定表达目的蛋白的细胞株。Blasticidin S (ST018)可以从碧云天购买。

Blasticidin S是来源于灰色链霉菌(Streptomyces griseochromogenes)的一种核苷类抗生素，中文名为灭瘟素S、杀稻瘟菌素S或稻瘟散。Blasticidin S特异性地抑制原核细胞或真核细胞的蛋白质合成，从而杀死细胞。Blasticidin S抗性基因(bsr/BSD/bls)所编码的Blasticidin S脱氨酶可以催化Blasticidin S发生脱氨基反应生成对细胞无毒性的Blasticidin S脱氨羟基化衍生物，从而使细胞对Blasticidin S产生抗性。因此，Blasticidin S可用于筛选携带bsr/BSD/bls基因(常标记为bsr^r/bsd^r/Blast^r)质粒的哺乳动物稳定转染细胞株，也可用于大肠杆菌等原核细胞的筛选。

Blasticidin S具有快速而强效的作用模式，通常可在不到一周的时间内即可筛选到具有Blasticidin S抗性的稳定哺乳动物细胞系。工作浓度范围1-50μg/ml，通常建议使用10μg/ml的浓度进行稳定哺乳动物细胞株的筛选，实际使用时应针对不同的细胞系测试Blasticidin S的浓度梯度，以确定最佳使用浓度。

pCMV-C-HA-Bla质粒(4958bp)的图谱如下：

pCMV-C-HA-Bla质粒的主要信息如下：

pCMV-C-HA-Bla的多克隆位点的详细图谱见说明书：https://www.beyotime.com/Manual/D2775 pCMV-C-HA-Bla.pdf

pCMV-C-HA-Bla中没有的酶切位点(Restriction enzymes that do not cut pCMV-C-HA-Bla)包括：

pCMV-C-HA-Bla中的单酶切位点(Restriction enzymes that cut pCMV-C-HA-Bla once)包括：

pCMV-C-HA-Bla质粒中对插入片段进行测序时，推荐使用的正向测序引物T3和反向测序引物T7的序列如下：

T3 primer (1654-1672): 5'AATTAACCCTCACTAAAGG 3'

T7 primer (1856-1874): 5'TAATACGACTCACTATAGG 3'

pCMV-C-HA-Bla的全序列信息:D2775 pCMV-C-HA-Bla-seq.txt

不同真核表达质粒的比较和选择，以及标签和抗性的考虑可以参考如下网页：

https://www.beyotime.com/goods.do?method=lcode&lcode=001001001004

-20℃保存。

本质粒未经碧云天书面许可不得用于任何商业用途，也不得移交给订货人所在实验室外的任何个人或单位。

本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。

为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。