pCMV-Cre-EGFP是碧云天自行研发的含有CMV启动子的用于在哺乳动物细胞中表达带有EGFP (Enhanced Green Fluorescent Protein, 增强绿色荧光蛋白)标签的Cre Recombinase (Cre重组酶)的表达质粒。来自条件性基因敲除(Conditional gene knockout) 小鼠等含有预先插入loxP位点的细胞在转染本质粒后，本质粒表达的Cre Recombinase可以导致两个loxP位点间的基因删除，从而实现条件性基因敲除。

Cre重组酶是来源于大肠杆菌噬菌体P1的一种类型I的拓朴异构酶(Type I topoisomerase)，也是一种酪氨酸重组酶(tyrosine recombinase)，它可识别34bp的loxP位点(两端为两个13bp的反向重复序列(inverted repeats)，中间是8bp的间隔区(图1)并催化loxP位点之间的DNA发生重组；重组产物根据loxP位点的位置和相对方向的不同而不同，两个含单loxP位点的DNA将发生融合：两个正向重复的loxP位点间的DNA将以环状形式被切割，而两个反向loxP位点间的DNA序列将被翻转(图2)。

图2. Cre-loxP位点特异性重组示意图。

pCMV-Cre-EGFP质粒转染HeLa细胞后的荧光表达效果，可以看到EGFP标签的Cre重组酶主要分布在细胞核中(图3)。

图3. pCMV-Cre-EGFP质粒转染HeLa细胞后的表达效果图。左图为明场照片，中图为荧光照片，右图为叠加照片。

本质粒为卡那霉素抗性，转染细胞后，可使用G418筛选稳定表达目的蛋白的细胞株。

pCMV-Cre-EGFP质粒的主要信息如下：

pCMV-Cre-EGFP质粒(6039bp)的图谱如下：

pCMV-Cre-EGFP的详细图谱见说明书：https://www.beyotime.com/Manual/D2608 pCMV-Cre-EGFP.pdf

pCMV-Cre-EGFP中没有的酶切位点(Restriction enzymes that do not cut pCMV-Cre-EGFP)包括：

pCMV-Cre-EGFP中的单酶切位点(Restriction enzymes that cut pCMV-Cre-EGFP)包括：

如需对pCMV-Cre-EGFP质粒中插入片段Cre-EGFP进行测序时，推荐使用的正向测序引物T3和反向测序引物T7的序列如下：

T3 primer (620-639): 5' AATTAACCCTCACTAAAGGG 3'

T7 primer (2541-2562): 5' GTAATACGACTCACTATAGGGC 3'

pCMV-Cre-EGFP的全序列信息:：D2608 pCMV-Cre-EGFP 全序列.txt

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本质粒未经碧云天书面许可不得用于任何商业用途，也不得移交给订货人所在实验室外的任何个人或单位。

本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。

为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。