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碧云天 SP6 RNA Polymera... 当商品进行补货时,我们将以短信、邮件的形式通知您,最多发送一次,不会对您造成干扰。 |
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产品编号 | 产品名称 | 产品包装 | 产品价格 |
R7006S | SP6 RNA Polymerase | 1KU | 136.00元 |
R7006M | SP6 RNA Polymerase | 5KU | 413.00元 |
R7006L | SP6 RNA Polymerase | 25KU | 1449.00元 |
R7006XL | SP6 RNA Polymerase | 100KU | 4868.00元 |
SP6 RNA Polymerase,即SP6 RNA聚合酶,是一种高度特异识别SP6启动子序列的DNA依赖的5'→3' RNA聚合酶。SP6 RNA Polymerase可以催化单链或双链DNA SP6 启动子下游NTP的掺入,合成与SP6启动子下游的模板DNA互补的RNA。
特点:SP6 RNA Polymerase不仅可以进行常规的RNA合成,还可以识别修饰的NTP,例如生物素标记、地高辛标记、荧光素标记的NTP,可以用于各种标记RNA的合成。同时对于SP6启动子有高度的特异性。
碧云天生产的SP6 RNA Polymerase以带有SP6 Promoter的线性化质粒DNA为模板进行转录时的效果参见图1。
图1. 碧云天生产的SP6 RNA Polymerase与国外N公司同类产品(Competitor)以带有SP6 Promoter的线性化质粒DNA为模板进行体外转录时的效果图。在20µl反应体系(40mM Tris-HCl pH7.9, 2mM Spermidine, 6mM MgCl2, 1mM DTT)中,加入0.2μg线性化质粒DNA,以及图中指定量的本产品或N公司(Competitor)的SP6 RNA Polymerase,37℃孵育2h,70℃孵育10min终止反应,加入2U DNase I (D7073),37℃孵育15min消化模板DNA,得到的RNA转录产物为198nt。取出5μl反应产物,加入5μl 2X RNA Loading Buffer,70℃变性10min,然后进行1%琼脂糖凝胶电泳,用1X TAE作为电泳液,150V电泳10min,染色后拍照观察结果。如图所示,本产品与N公司的产品相比,具有相近或略优的转录效果。
用途:用于RNA合成,合成的RNA可以用于或用作:杂交探针,基因组DNA序列分析,核糖核酸酶保护测定(RNase protection assay),反义RNA合成,作为体外翻译的RNA模板,RNA剪接研究的底物,RNA二级结构和RNA-蛋白质相互作用,核酸扩增分析,siRNA、miRNA等小RNA。
来源:由大肠杆菌表达,表达基因为嗜菌体SP6 RNA Polymerase基因。
活性定义: 37℃ 60分钟内,催化1 nmol AMP掺入到多聚核苷酸中所需的酶量定义为1个活性单位。
活性检测条件:40mM Tris-HCl (pH8.0),6mM MgCl2,10mM DTT,2mM spermidine,0.5mM NTP,0.6MBq/ml [3H]-ATP,20µg/ml plasmid DNA containing the specific SP6 RNA Polymerase promoter sequence。
纯度:不含DNA内切酶和外切酶,不含RNA酶。
酶储存溶液:50mM Tris-HCl (pH7.9, 25℃), 100mM NaCl, 5mM DTT, 1mM EDTA, 50% (v/v) Glycerol, 0.1% (w/v) Triton X-100.
Transcription Buffer (10X):400mM Tris-HCl (pH7.9, 25℃), 20mM spermidine, 60mM MgCl2, 10mM DTT.
失活或抑制:70℃加热10分钟可使SP6 RNA Polymerase失活。加入适量EDTA也可以使SP6 RNA Polymerase失活。螯合剂、浓度大于150mM的钠、钾或铵盐可以显著抑制SP6 RNA Polymerase的活性。
SP6 consensus promoter sequence如下,其中的G为转录的第一个碱基。
ATTTAGGTGACACTATAGAAGNG
包装清单:产品编号 | 产品名称 | 包装 |
R7006S-1 | SP6 RNA Polymerase (20U/µl) | 50µl |
R7006S-2 | 10X SP6 Transcription Buffer | 100µl |
- | 说明书 | 1份 |
产品编号 | 产品名称 | 包装 |
R7006M-1 | SP6 RNA Polymerase (20U/µl) | 250µl |
R7006M-2 | 10X SP6 Transcription Buffer | 500µl |
- | 说明书 | 1份 |
产品编号 | 产品名称 | 包装 |
R7006L-1 | SP6 RNA Polymerase (20U/µl) | 1.25ml |
R7006L-2 | 10X SP6 Transcription Buffer | 1.25ml×2 |
- | 说明书 | 1份 |
产品编号 | 产品名称 | 包装 |
R7006XL-1 | SP6 RNA Polymerase (20U/µl) | 1.25ml×4 |
R7006XL-2 | 10X SP6 Transcription Buffer | 1.25ml×8 |
- | 说明书 | 1份 |
-20℃保存。
注意事项:酶使用时宜存放在冰盒内或冰浴上,使用完毕后宜立即放置于-20℃保存。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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