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碧云天 SP6 RNA Polymerase(SP6 RNA聚合酶)(R7006M)

mRNA疫苗相关

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  • 商品名称:碧云天 SP6 RNA Polymerase(SP6 RNA聚合酶)(R7006M)
  • 商品编号:R7006M
  • 品牌:碧云天
  • 上架时间:2022-08-26
  • 商品毛重:100.100千克
  • 库存: 65535
  • 详细参数>>
产品编号 产品名称 产品包装 产品价格
R7006S SP6 RNA Polymerase 1KU 136.00元
R7006M SP6 RNA Polymerase 5KU 413.00元
R7006L SP6 RNA Polymerase 25KU 1449.00元
R7006XL SP6 RNA Polymerase 100KU 4868.00元

SP6 RNA Polymerase,即SP6 RNA聚合酶,是一种高度特异识别SP6启动子序列的DNA依赖的5'→3' RNA聚合酶。SP6 RNA Polymerase可以催化单链或双链DNA SP6 启动子下游NTP的掺入,合成与SP6启动子下游的模板DNA互补的RNA。

特点:SP6 RNA Polymerase不仅可以进行常规的RNA合成,还可以识别修饰的NTP,例如生物素标记、地高辛标记、荧光素标记的NTP,可以用于各种标记RNA的合成。同时对于SP6启动子有高度的特异性。

碧云天生产的SP6 RNA Polymerase以带有SP6 Promoter的线性化质粒DNA为模板进行转录时的效果参见图1。

图1. 碧云天生产的SP6 RNA Polymerase与国外N公司同类产品(Competitor)以带有SP6 Promoter的线性化质粒DNA为模板进行体外转录时的效果图。在20µl反应体系(40mM Tris-HCl pH7.9, 2mM Spermidine, 6mM MgCl2, 1mM DTT)中,加入0.2μg线性化质粒DNA,以及图中指定量的本产品或N公司(Competitor)的SP6 RNA Polymerase,37℃孵育2h,70℃孵育10min终止反应,加入2U DNase I (D7073),37℃孵育15min消化模板DNA,得到的RNA转录产物为198nt。取出5μl反应产物,加入5μl 2X RNA Loading Buffer,70℃变性10min,然后进行1%琼脂糖凝胶电泳,用1X TAE作为电泳液,150V电泳10min,染色后拍照观察结果。如图所示,本产品与N公司的产品相比,具有相近或略优的转录效果。

用途:用于RNA合成,合成的RNA可以用于或用作:杂交探针,基因组DNA序列分析,核糖核酸酶保护测定(RNase protection assay),反义RNA合成,作为体外翻译的RNA模板,RNA剪接研究的底物,RNA二级结构和RNA-蛋白质相互作用,核酸扩增分析,siRNA、miRNA等小RNA。

来源:由大肠杆菌表达,表达基因为嗜菌体SP6 RNA Polymerase基因。

活性定义: 37℃ 60分钟内,催化1 nmol AMP掺入到多聚核苷酸中所需的酶量定义为1个活性单位。

活性检测条件:40mM Tris-HCl (pH8.0),6mM MgCl2,10mM DTT,2mM spermidine,0.5mM NTP,0.6MBq/ml [3H]-ATP,20µg/ml plasmid DNA containing the specific SP6 RNA Polymerase promoter sequence。

纯度:不含DNA内切酶和外切酶,不含RNA酶。

酶储存溶液:50mM Tris-HCl (pH7.9, 25℃), 100mM NaCl, 5mM DTT, 1mM EDTA, 50% (v/v) Glycerol, 0.1% (w/v) Triton X-100.

Transcription Buffer (10X):400mM Tris-HCl (pH7.9, 25℃), 20mM spermidine, 60mM MgCl2, 10mM DTT.

失活或抑制:70℃加热10分钟可使SP6 RNA Polymerase失活。加入适量EDTA也可以使SP6 RNA Polymerase失活。螯合剂、浓度大于150mM的钠、钾或铵盐可以显著抑制SP6 RNA Polymerase的活性。

SP6 consensus promoter sequence如下,其中的G为转录的第一个碱基。

ATTTAGGTGACACTATAGAAGNG

包装清单:
产品编号 产品名称 包装
R7006S-1 SP6 RNA Polymerase (20U/µl) 50µl
R7006S-2 10X SP6 Transcription Buffer 100µl
说明书 1份

产品编号 产品名称 包装
R7006M-1 SP6 RNA Polymerase (20U/µl) 250µl
R7006M-2 10X SP6 Transcription Buffer 500µl
说明书 1份

产品编号 产品名称 包装
R7006L-1 SP6 RNA Polymerase (20U/µl) 1.25ml
R7006L-2 10X SP6 Transcription Buffer 1.25ml×2
说明书 1份

产品编号 产品名称 包装
R7006XL-1 SP6 RNA Polymerase (20U/µl) 1.25ml×4
R7006XL-2 10X SP6 Transcription Buffer 1.25ml×8
说明书 1份
保存条件:

-20℃保存。

注意事项:

酶使用时宜存放在冰盒内或冰浴上,使用完毕后宜立即放置于-20℃保存。

本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。

为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

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