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碧云天 T7 RNA Polymerase(T7 RNA聚合酶)(R7012S)

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  • 商品名称:碧云天 T7 RNA Polymerase(T7 RNA聚合酶)(R7012S)
  • 商品编号:R7012S
  • 品牌:碧云天
  • 上架时间:2022-08-26
  • 商品毛重:100.100千克
  • 库存: 65535
  • 详细参数>>
产品编号 产品名称 产品包装 产品价格
R7012S T7 RNA Polymerase 1KU 122.00元
R7012M T7 RNA Polymerase 5KU 381.00元
R7012L T7 RNA Polymerase 25KU 1376.00元
R7012XL T7 RNA Polymerase 100KU 4453.00元

T7 RNA Polymerase,即T7 RNA聚合酶,是一种高度特异识别T7启动子序列的DNA依赖的5'→3' RNA聚合酶。T7 RNA Polymerase可以催化单链或双链DNA T7 启动子下游NTP的掺入,合成与T7启动子下游的模板DNA互补的RNA。

特点:T7 RNA Polymerase不仅可以进行常规的RNA合成,还可以识别修饰的NTP,例如生物素标记、地高辛标记、荧光素标记的NTP,可以用于各种标记RNA的合成。同时对于T7启动子有高度的特异性。

碧云天生产的T7 RNA Polymerase以含有T7 Promoter的PCR产物为模板进行体外转录时的效果请参见图1。

图1.碧云天生产的T7 RNA Polymerase与N公司T7 RNA Polymerase (Competitor)以含有T7 Promoter的PCR产物为模板进行体外转录时的效果图。在20µl反应体系(40mM Tris-HCl pH7.9, 2mM Spermidine, 6mM MgCl2, 1mM DTT)中,加入以含有T7 Promoter的PCR产物作为模板DNA以及图中指定量的本产品或N公司(Competitor)的T7 RNA Polymerase,37℃孵育1h,70℃孵育10min终止反应,加入2U DNase I (D7073)消化模板DNA,得到的RNA转录产物为101nt。取出5μl反应产物,加入1μl 6X DNA Loading Buffer (D0071),95℃变性5min,然后室温条件下用含7M Urea的15%聚丙烯酰胺凝胶进行电泳,以1X TBE作为电泳液,180V电泳120min。电泳结束后,NA-Red (D0130) 2000倍稀释后室温染色10min,拍照观察结果。如图所示,本产品与N公司的产品相比,具有相近或略优的转录效果。

用途:用于RNA合成,合成的RNA可以用于或用作:杂交探针,基因组DNA序列分析,核糖核酸酶保护测定(RNase protection assay),反义RNA合成,作为体外翻译的RNA模板,RNA剪接研究的底物,RNA二级结构和RNA-蛋白质相互作用,核酸扩增分析,siRNA、miRNA等小RNA。

来源:由大肠杆菌表达,表达基因为嗜菌体T7 RNA Polymerase基因。

活性定义:37℃ 60分钟内,催化1 nmol AMP 掺入到多聚核苷酸中所需的酶量定义为1个活性单位。

活性检测条件:40mM Tris-HCl (pH8.0),6mM MgCl2,10mM DTT,2mM spermidine,0.5mM NTP,0.6MBq/ml [3H]-ATP,20µg/ml plasmid DNA containing the specific T7 RNA Polymerase promoter sequence。

纯度:不含DNA内切酶和外切酶,不含RNA酶。

酶储存溶液:50mM Tris-HCl (pH7.5, 25℃), 100mM NaCl, 1mM DTT, 1mM EDTA, 50% (v/v) Glycerol, 0.1% (w/v) Triton X-100.

Transcription Buffer (10X):400mM Tris-HCl (pH7.9, 25℃), 20mM spermidine, 60mM MgCl2, 10mM DTT.

失活或抑制:70℃加热10分钟可使T7 RNA Polymerase失活。加入适量EDTA 也可以使T7 RNA Polymerase失活。螯合剂、浓度大于150mM的钠、钾或铵盐可以显著抑制T7 RNA Polymerase的活性。

T7 consensus promoter sequence如下,其中的G为转录的第一个碱基。

TAATACGACTCACTATAGGGAGA

包装清单:
产品编号 产品名称 包装
R7012S-1 T7 RNA Polymerase (50U/µl) 20µl
R7012S-2 10X T7 Transcription Buffer 25µl
说明书 1份

产品编号 产品名称 包装
R7012M-1 T7 RNA Polymerase (50U/µl) 100µl
R7012M-2 10X T7 Transcription Buffer 120µl
说明书 1份

产品编号 产品名称 包装
R7012L-1 T7 RNA Polymerase (50U/µl) 500µl
R7012L-2 10X T7 Transcription Buffer 600µl
说明书 1份

产品编号 产品名称 包装
R7012XL-1 T7 RNA Polymerase (50U/µl) 2.0ml
R7012XL-2 10X T7 Transcription Buffer 1.2ml×2
说明书 1份
保存条件:

-20℃保存。

注意事项:

酶使用时宜存放在冰盒内或冰浴上,使用完毕后宜立即放置于-20℃保存。

本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。

为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

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