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碧云天 BeyoRT Q M-MLV反转录酶(D7188S)

PCR相关

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  • 商品名称:碧云天 BeyoRT Q M-MLV反转录酶(D7188S)
  • 商品编号:D7188S
  • 品牌:碧云天
  • 上架时间:2022-08-29
  • 商品毛重:10.100千克
  • 库存: 65535
  • 详细参数>>
产品编号 产品名称 产品包装 产品价格
D7188S BeyoRT™ Q M-MLV反转录酶 10KU 122.00元
D7188M BeyoRT™ Q M-MLV反转录酶 50KU 486.00元
D7188L BeyoRT™ Q M-MLV反转录酶 200KU 1608.00元

碧云天生产的BeyoRT™ Q M-MLV反转录酶,即BeyoRT™ Q M-MLV reverse transcriptase,是一种经过改造和优化特别适合定量PCR(quantitative PCR, qPCR)的高精确度反转录酶。BeyoRT™ Q M-MLV反转录酶具有正常的依赖于RNA或DNA模板的DNA聚合酶活性,能够以RNA或DNA为模板,在引物存在的情况下进行互补DNA链的合成,即可以进行cDNA(complementary DNA)的第一链合成。同时本反转录酶还保留了RNase H活性,能选择性剪切RNA和DNA杂合双链中的RNA,有利于后续cDNA第二链的合成。

本产品是最常用的优质反转录酶之一,广泛用于获得总RNA或mRNA后cDNA第一条链的合成,特别适合用于qPCR和一步法的qRT-PCR,本产品的反转录产物也适合用于常规的PCR、cDNA的第二链合成以及cDNA文库的构建,以及逆转录所得目的基因的克隆等。BeyoRT™ Q M-MLV反转录酶还可以通过反转录用于DNA探针的荧光、生物素、地高辛或同位素标记等,也可以通过引物延伸(primer extension)来分析和研究RNA。

M-MLV (Moloney Murine Leukemia Virus),也称MMLV或M-MuLV;反转录酶(reverse transcriptase)也称逆转录酶或RT酶。

本产品反转录性能优、检测灵敏度高、扩增特异性强、反应稳定性好,不仅非常适合用于常规的RNA样品的反转录和qPCR检测或一步法qRT-PCR检测,也非常适合于內源低丰度RNA、外源病毒RNA等微量RNA的反转录及后续的qPCR检测。

利用BeyoRT™ Q M-MLV反转录酶对总RNA进行反转录,之后以不同稀释倍数的cDNA为模板,通过qPCR检测目的基因的结果请参考图1。

图1.BeyoRT™ Q M-MLV反转录酶对总RNA进行反转录后用于qPCR检测的效果图。从HEK293T细胞抽提获得的总RNA 2µg,在20μl反转录体系(2µg Total RNA, 0.5μg Oligo(dT)18 primer, 0.2μg Random Hexamer primer, 1X Reaction Buffer, 20U RNase Inhibitor, dNTP Mix (1mM each), 200U BeyoRT™ Q M-MLV反转录酶)中进行反转录,反转录后取1μl (100%)或不同稀释比例(1μl的10%、1%、0.1%、0.01%)反转录产物进行GAPDH cDNA 151bp目的片段的qPCR扩增和电泳检测。A.扩增曲线图。B.溶解曲线图。C.qPCR扩增产物的电泳图。NTC (no-template control),用水代替反转录产物。qPCR反应体系20µl,使用碧云天生产的D7260 BeyoFast™ SYBR Green qPCR Mix (2X)。实际检测效果会和特定实验条件有关,图中结果仅供参考。

来源:大肠杆菌表达纯化的经过优化改造的M-MLV反转录酶。

酶活性定义:One unit of the enzyme incorporates 1 nmol of dTTP into acid-precipitable material in 10min at 37℃ using poly(A)•oligo(dT)12-18 as template-primer。反应体系为50mM Tris-HCl (pH8.3), 75mM KCl, 3mM MgCl2, 10mM DTT, 0.5mM [3H]-dTTP and 0.4mM polyA•oligo(dT)12-18

纯度:不含DNA内切酶、外切酶和磷酸酯酶和RNA酶,可以满足常规反转录合成cDNA第一条链等的需要。

酶储存溶液:20mM Tris-HCl (pH7.5), 150mM NaCl, 0.1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01%(v/v) NP-40 and 50%(v/v) glycerol。

失活或抑制:80℃孵育10分钟可以导致BeyoRT™ Q M-MLV反转录酶失活;EDTA、EGTA等螯合剂、无机磷酸盐或焦磷酸盐以及聚氨(polyamine)对BeyoRT™ Q M-MLV反转录酶有抑制作用。

本产品中M-MLV反转录酶的浓度为200U/µl,用于体积为20μl的反转录体系时,本试剂盒的不同包装足够分别进行50次、250次和1000次反转录反应。

关于碧云天不同反转录酶的比较和选择,可参考相关网页:http://www.beyotime.com/support/reversetranscriptase.htm

包装清单:
产品编号 产品名称 包装
D7188S-1 BeyoRT™ Q M-MLV反转录酶 50µl
D7188S-2 Reaction Buffer(5X) 0.3ml
说明书 1份

产品编号 产品名称 包装
D7188M-1 BeyoRT™ Q M-MLV反转录酶 250µl
D7188M-2 Reaction Buffer(5X) 1.2ml
说明书 1份

产品编号 产品名称 包装
D7188L-1 BeyoRT™ Q M-MLV反转录酶 1ml
D7188L-2 Reaction Buffer(5X) 5ml
说明书 1份
保存条件:

-20℃保存。

注意事项:

对于GC含量比较高的RNA的反转录,产品的使用说明中给予了特别说明,请予以关注。

本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。

为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

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