碧云天生产的BeyoRT™ Q M-MLV反转录酶，即BeyoRT™ Q M-MLV reverse transcriptase，是一种经过改造和优化特别适合定量PCR(quantitative PCR, qPCR)的高精确度反转录酶。BeyoRT™ Q M-MLV反转录酶具有正常的依赖于RNA或DNA模板的DNA聚合酶活性，能够以RNA或DNA为模板，在引物存在的情况下进行互补DNA链的合成，即可以进行cDNA(complementary DNA)的第一链合成。同时本反转录酶还保留了RNase H活性，能选择性剪切RNA和DNA杂合双链中的RNA，有利于后续cDNA第二链的合成。

本产品是最常用的优质反转录酶之一，广泛用于获得总RNA或mRNA后cDNA第一条链的合成，特别适合用于qPCR和一步法的qRT-PCR，本产品的反转录产物也适合用于常规的PCR、cDNA的第二链合成以及cDNA文库的构建，以及逆转录所得目的基因的克隆等。BeyoRT™ Q M-MLV反转录酶还可以通过反转录用于DNA探针的荧光、生物素、地高辛或同位素标记等，也可以通过引物延伸(primer extension)来分析和研究RNA。

M-MLV (Moloney Murine Leukemia Virus)，也称MMLV或M-MuLV；反转录酶(reverse transcriptase)也称逆转录酶或RT酶。

本产品反转录性能优、检测灵敏度高、扩增特异性强、反应稳定性好，不仅非常适合用于常规的RNA样品的反转录和qPCR检测或一步法qRT-PCR检测，也非常适合于內源低丰度RNA、外源病毒RNA等微量RNA的反转录及后续的qPCR检测。

利用BeyoRT™ Q M-MLV反转录酶对总RNA进行反转录，之后以不同稀释倍数的cDNA为模板，通过qPCR检测目的基因的结果请参考图1。

图1.BeyoRT™ Q M-MLV反转录酶对总RNA进行反转录后用于qPCR检测的效果图。从HEK293T细胞抽提获得的总RNA 2µg，在20μl反转录体系(2µg Total RNA, 0.5μg Oligo(dT)₁₈ primer, 0.2μg Random Hexamer primer, 1X Reaction Buffer, 20U RNase Inhibitor, dNTP Mix (1mM each), 200U BeyoRT™ Q M-MLV反转录酶)中进行反转录，反转录后取1μl (100%)或不同稀释比例(1μl的10%、1%、0.1%、0.01%)反转录产物进行GAPDH cDNA 151bp目的片段的qPCR扩增和电泳检测。A.扩增曲线图。B.溶解曲线图。C.qPCR扩增产物的电泳图。NTC (no-template control)，用水代替反转录产物。qPCR反应体系20µl，使用碧云天生产的D7260 BeyoFast™ SYBR Green qPCR Mix (2X)。实际检测效果会和特定实验条件有关，图中结果仅供参考。

来源：大肠杆菌表达纯化的经过优化改造的M-MLV反转录酶。

酶活性定义：One unit of the enzyme incorporates 1 nmol of dTTP into acid-precipitable material in 10min at 37℃ using poly(A)•oligo(dT)_12-18 as template-primer。反应体系为50mM Tris-HCl (pH8.3), 75mM KCl, 3mM MgCl₂, 10mM DTT, 0.5mM [³H]-dTTP and 0.4mM polyA•oligo(dT)_12-18。

纯度：不含DNA内切酶、外切酶和磷酸酯酶和RNA酶，可以满足常规反转录合成cDNA第一条链等的需要。

酶储存溶液：20mM Tris-HCl (pH7.5), 150mM NaCl, 0.1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01%(v/v) NP-40 and 50%(v/v) glycerol。

失活或抑制：80℃孵育10分钟可以导致BeyoRT™ Q M-MLV反转录酶失活；EDTA、EGTA等螯合剂、无机磷酸盐或焦磷酸盐以及聚氨(polyamine)对BeyoRT™ Q M-MLV反转录酶有抑制作用。

本产品中M-MLV反转录酶的浓度为200U/µl，用于体积为20μl的反转录体系时，本试剂盒的不同包装足够分别进行50次、250次和1000次反转录反应。

关于碧云天不同反转录酶的比较和选择，可参考相关网页：http://www.beyotime.com/support/reversetranscriptase.htm

-20℃保存。

对于GC含量比较高的RNA的反转录，产品的使用说明中给予了特别说明，请予以关注。

本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。

为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。