全部商品分类
常规试剂、生化试剂
通用耗材
实验室常用设备
生命科学仪器
水质、物性检测
光学、色谱相关
安全、环境监测
专业、行业仪器

碧云天 Uracil-DNA Glycosylase (Heat-labile, Bacterium)(热敏型细菌UDG)(D7362M)

等温扩增

售价¥ 降价通知

市场价¥226
  • 累积评价0人评价

  • 累计销量 0件

  • 赠送积分226

卖家:平台自营
商家名称    i实验室
在线客服      和我联系
客 服 QQ     QQ
客服邮件    
iallab@126.com
客服电话    
400-069-1717
所在地区:
上海市

扫一扫,手机访问微商城

推荐精品

最近上新

  • 商品名称:碧云天 Uracil-DNA Glycosylase (Heat-labile, Bacterium)(热敏型细菌UDG)(D7362M)
  • 商品编号:D7362M
  • 品牌:碧云天
  • 上架时间:2022-08-29
  • 商品毛重:10.100千克
  • 库存: 65535
  • 详细参数>>
产品编号 产品名称 产品包装 产品价格
D7362S Uracil-DNA Glycosylase (Heat-labile, Bacterium) 100U 65.00元
D7362M Uracil-DNA Glycosylase (Heat-labile, Bacterium) 500U 226.00元

碧云天生产的Uracil-DNA Glycosylase (Heat-labile, Bacterium),也称Heat-labile Bacterial UDG,即热敏型细菌UDG,来源于嗜冷海洋细菌(psychrophilic marine bacterium) BMTU3346,可催化含尿嘧啶的DNA链中的尿嘧啶(dU)碱基和脱氧核糖之间的N-糖苷键发生水解,从而释放游离尿嘧啶。Uracil-DNA Glycosylase (UDG)可以水解含有dU的单链或双链DNA,但不能水解RNA或含有dU的长度不超过6个碱基DNA寡聚体。

UDG主要应用于消除PCR扩增过程中带来的产物污染问题。其防止污染的原理为:在PCR反应中加入适量的dUTP,以dUTP替代dTTP掺入DNA中,形成含dU碱基的PCR扩增产物;后续进行PCR反应时,使用UDG酶选择性切割可能被污染而带入的之前PCR扩增产生的含有dU的单链或双链DNA,从而避免之前的PCR扩增产物可能的污染对于本次PCR扩增带来的负面影响。

本产品为热敏型,在50℃孵育10分钟可以迅速不可逆灭活。在PCR或RT-PCR反应前,PCR或RT-PCR体系中加入Heat-labile Bacterium UDG室温处理10min,即可充分消除可能的之前的含有dUTP的PCR扩增产物的污染。本产品不仅适用于PCR,也适用于qPCR、RT-PCR和qRT-PCR等体系。

活性定义:One unit is defined as the amount of enzyme that catalyzes the release of 60 pmol of uracil per minute from double-stranded, uracilcontaining DNA. Activity is measured by release of [3H]-uracil in a 50 µl Standard Taq Reaction Buffer containing 0.2 µg DNA (104–105 cpm/µg) in 30 minutes at 37℃.

碧云天生产的Heat-labile Bacterial UDG酶活性鉴定结果可参考图1。

图1.碧云天和N公司的Heat-labile Bacterial UDG催化酶解5µl含dU碱基的PCR扩增产物效果图。使用本产品或国外N公司的酶,在20µl体系,分别以5µl含dU碱基的PCR扩增1500bp PCR产物为底物和不同量的(0U, 0.0313U, 0.0625U, 0.125U, 0.25U, 0.5U) Heat-labile Bacterial UDG,在1X Heat-labile Bacterial UDG Buffer,37℃孵育30min,然后进行1%的琼脂糖凝胶电泳检测。如图所示,本产品与N公司相比,具有相当的酶活。M, DNA marker (D0110 DNA Ladder (0.2-12 kb, 12 bands))。

碧云天生产的Heat-labile Bacterial UDG经灭活处理后酶活鉴定结果可参考图2。

图2.碧云天和N公司的Heat-labile Bacterial UDG以及碧云天生产的E. coli UDG (D7360)经50℃10min处理后,催化酶解5µl含dU碱基的PCR扩增产物效果图。将不同量的E. coli UDG (0U, 0.005U, 0.01U, 0.025U)和碧云天以及N公司不同量的Heat-labile Bacterial UDG (0U, 0.0625U, 0.125U, 0.25U)经50℃处理10min之后,在20µl体系,分别以5µl含dU碱基的PCR扩增1500bp PCR产物为底物,在1X Heat-labile Bacterial UDG Buffer,37℃孵育30min,然后进行1%的琼脂糖凝胶电泳检测。如图所示,E. coli UDG 50℃处理10min之后酶活仅轻微下降,而碧云天和N公司的Heat-labile Bacterial UDG均完全灭活。M, DNA marker (D0110 DNA Ladder (0.2-12 kb, 12 bands))。

来源:大肠杆菌重组、表达和纯化而获得。

纯度:不含UDG酶活力之外的内切或外切脱氧核糖核酸酶、RNase和磷酸酶活性。

用途:去除单链或双链DNA尿嘧啶碱基;去除含dU的PCR产物气溶胶污染;在二代测序(NGS)应用中,主要用于mRNA定向测序文库的构建;用于提高定向诱变方法的效率和用来获得高度标记的寡核苷酸探针;用于PCR、qPCR、RT-PCR、RT-qPCR体系。

酶储存溶液:20mM Tris-HCl (pH 7.5), 50mM NaCl, 0.1mM EDTA, 1mM DTT, 50% (v/v) glycerol。

10X Heat-labile Bacterial UDG Buffer:100mM Tris-HCl, 500mM KCl, 15mM MgCl2, pH 8.3 at 25℃。

失活或抑制:50℃加热10min可以使Heat-labile Bacterial UDG完全失活。

包装清单:
产品编号 产品名称 包装
D7362S-1 Heat-labile Bacterial UDG (1U/μl) 100µl
D7362S-2 10X Heat-labile Bacterial UDG Buffer 500µl
说明书 1份

产品编号 产品名称 包装
D7362M-1 Heat-labile Bacterial UDG (1U/μl) 500µl
D7362M-2 10X Heat-labile Bacterial UDG Buffer 2.5ml
说明书 1份
保存条件:

-20℃保存,至少一年有效。

注意事项:

Heat-labile Bacterial UDG酶在大多数PCR或RT-PCR体系中均具有活性,但对于自行使用的PCR或RT-PCR体系,首次使用时建议先测试一下是否和所使用的体系兼容。通常取含dUTP的PCR扩增产物,参考图1加入适量UDG,观察能否有效降解含dUTP的PCR扩增产物。本产品会被高离子强度(>100mM)所抑制。

dNTP/dUTP推荐选购碧云天的D7376 dNTP/dUTP Mixture (2.5mM each/5mM)

Heat-labile Bacterial UDG酶对双链DNA的活性低于对单链DNA的活性,对小的U-DNA寡核苷酸和dUMP有活性,但对RNA或正常的不含dUTP的DNA没有活性。

Heat-labile Bacterial UDG酶活对于金属离子没有依赖性,在Mg2+或EDTA的存在情况下均具有活性。

由Heat-labile Bacterial UDG酶消化产生的DNA链的无碱基位点可通过加热,碱处理或核酸内切核酸酶处理而除去。通常PCR反应过程中的加热步骤可以确保UDG酶消化的位点被完全剪切开。

Heat-labile Bacterial UDG酶可以在PCR反应前清除不慎污染的含dUTP的PCR产物,从而避免由于污染导致的PCR假阳性结果。

如果需要将Heat-labile Bacterial UDG酶应用于One-Step RT-PCR或者One-Step qRT-PCR体系,需要选择耐热反转录酶,并需要将逆转录温度设置为50-55℃。

本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。

为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

售后保障
i实验室出售仪器设备及耗材均为原厂正品,承诺提供“正品保障”服务。
对于在i实验室商城购买仪器设备及耗材的用户均提供商品正规发票。
i实验室出售的仪器设备均享受原厂一年全国联保服务。终身提供维修!
商品评价
  • 全部评价(0)
  • 好评(0)
  • 中评(0)
  • 差评(0)
  • 用户晒单(0)
仓储包装
我们的优势
常见问题
下单后可以修改订单吗?

由本网站发货的订单,在订单打印之前可以修改,打开“订单详情”页面,点击右上角的“修改订单”即可,若没有修改订单按钮,则表示订单无法修改。

无货商品几天可以到货?

您可以通过以下方法获取商品的到货时间:若商品页面中,显示“无货”时:商品具体的到货时间是无法确定的,您可以通过商品页面的“到货通知”功能获得商品到货提醒。

订单如何取消?

如订单处于暂停状态,进入“我的订单"页面,找到要取消的订单,点击“取消订单”按钮。

可以开发票吗?

本网站所售商品都是正品行货,均开具正规发票(图书商品用户自由选择是否开发票),发票金额含配送费金额,另有说明的除外。

如何联系商家?

在商品页面右则,您可以看到卖家信息,点击“联系客服”按钮,咨询卖家的在线客服人员,已开通400电话的卖家,您可直接致电卖家。

收到的商品少了/发错了怎么办?

同个订单购买多个商品可能会分为一个以上包裹发出,可能不会同时送达,建议您耐心等待1-2天,如未收到,本网站自营商品可直接联系中翼在线客服,第三方商家商品请联系商家在线客服。

如何申请退货/换货?

登陆网站,进入“我的订单”,点击客户服务下的返修/退换货或商品右则的申请返修/退换货,出现返修及退换货首页,点击“申请”即可操作退换货及返修,提交成功后请耐心等待,由专业的售后工作人员受理您的申请。

退换货/维修需要多长时间?

一般情况下,退货处理周期(不包含检测时间):自接收到问题商品之日起 7 日之内为您处理完成,各支付方式退款时间请点击查阅退款多久可以到账;
换货处理周期:自接收到问题商品之日起 15 日之内为您处理完成;
正常维修处理周期:自接收到问题商品之日起 30 日内为您处理完成。

对比栏