碧云天生产的T7 Quick High Yield Transcription Kit，即T7快速高产量RNA转录试剂盒，是一种利用T7 RNA Polymerase能在相对较短时间内进行体外RNA大量转录的特性而研发的RNA体外大量转录试剂盒。本试剂盒能以携带有T7 Promoter (TAATACGACTCACTATAGGG)序列的线性化质粒、PCR产物或合成的DNA片段等为模板，体外快速转录合成mRNA、lncRNA、shRNA等多种类型的RNA，每次转录的RNA量实测可以达到150-200μg。

本试剂盒兼容m1ψTP、ψTP，可以用于体外大量转录合成带有m1ψ等修饰的mRNA。本试剂盒也兼容生物素、地高辛、FITC、Cy3等标记的核苷酸，便于体外大量转录合成生物素、地高辛、FITC、Cy3等标记的RNA探针。

本试剂盒转录合成的RNA可用于体外翻译、转染细胞表达目的基因、RNA结构与功能研究、核酸酶生化研究、RNase保护实验、RNA剪切、微阵列分析、显微注射和mRNA疫苗等相关研究。

本试剂盒经过一系列优化，可以仅使用1μg的模板，在20μl的反应体系中，在2小时内产生多达150-200μg的RNA。本试剂盒对于长链和短链的RNA都有很好的转录效果，也可以按比例放大反应体系，从而可以轻松获得毫克级的RNA。

碧云天的T7 Quick High Yield Transcription Kit以带有T7 Promoter的线性化质粒DNA为模板进行转录时的产量参考图1。

图1. 碧云天的T7 Quick High Yield Transcription Kit以带有T7 Promoter的线性化质粒DNA为模板进行转录时的产量参考图。在20µl反应体系中，通过使用1.0μg 2878bp的线性化质粒DNA为模板，在37℃分别孵育0、15、30、60、120、240min，随后70℃孵育10min终止反应。加入等体积水后再加入1µl DNase I，37℃孵育15min消化模板DNA，得到的RNA转录产物的长度为175nt。用苯酚/氯仿抽提以及乙醇沉淀并用超微量紫外分光光度计检测得到的RNA产物量。实际产量会因具体实验条件的不同而产生差异，本图仅供参考。

本试剂盒中的ATP、CTP、GTP和UTP是预混合的，以方便使用。如果希望完全把某种核苷酸完全置换为修饰核苷酸并进行体外转录反应以获得大量RNA转录物，推荐使用碧云天研制的T7 High Yield RNA Transcription Kit (R7018)。

一个小包装的本产品可以进行25个20μl体系的体外反转录反应，一个中包装的本产品可以进行100个20μl体系的体外反转录反应。每个反应体系通常可以获得多达150-200μg体外转录的RNA。

-20℃保存，至少一年有效。

由于涉及RNA操作，需要严格按照RNA操作的规范进行，避免RNase污染，相关试剂和耗材需要经过DEPC处理以去除RNase或者确保是RNase free的。

如果希望合成加帽的RNA，须自备Cap analog，如m⁷(3'-O-methyl)-G(5')ppp(5')G等。如果希望合成生物素、地高辛、FITC、Cy3等标记的RNA或带有特殊修饰的RNA，相应的修饰NTP需要自备。

本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。

为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。