碧云天生产的SP6 High Yield Transcription Kit，即SP6高产量RNA转录试剂盒，是一种利用SP6 RNA Polymerase能在相对较短时间内进行体外RNA大量转录的特性而研发的RNA体外大量转录试剂盒。本试剂盒能以携带有SP6 Promoter (ATTTAGGTGACACTATAG)序列的线性化质粒、PCR产物或合成的DNA片段等为模板，体外转录合成mRNA、lncRNA、shRNA等多种类型的RNA，每次转录的RNA量实测可以达到80-100μg。

本试剂盒兼容m1ψTP、ψTP，可以用于体外大量转录合成带有m1ψ等修饰的mRNA，便于制备成mRNA疫苗。本试剂盒也兼容生物素、地高辛、FITC、Cy3等标记的核苷酸，便于体外大量转录合成生物素、地高辛、FITC、Cy3等标记的RNA探针。

本试剂盒转录合成的RNA可用于体外翻译、转染细胞表达目的基因、RNA结构与功能研究、核酸酶生化研究、RNase保护实验、RNA剪切、微阵列分析、显微注射和mRNA疫苗等相关研究。

本试剂盒经过一系列优化，可以仅使用1μg的模板，在20μl的反应体系中，在2小时内产生多达80-100μg的RNA。本试剂盒对于长链和短链的RNA都有很好的转录效果，也可以按比例放大反应体系，从而可以轻松获得毫克级的RNA。

碧云天的SP6 High Yield Transcription Kit以带有SP6 Promoter的线性化质粒DNA为模板进行转录时的产量参考图1。

图1.碧云天的SP6 High Yield Transcription Kit以带有SP6 Promoter的线性化质粒DNA为模板进行转录时的产量参考图。在20µl反应体系中，通过使用1.0μg 2878bp的线性化质粒DNA为模板，在37℃分别孵育0、15、30、60、120、240min，随后70℃孵育10min终止反应。加入等体积水后再加入1µl DNase I，37℃孵育15min消化模板DNA，得到的RNA转录产物的长度为198nt。用苯酚/氯仿抽提以及乙醇沉淀并用超微量紫外分光光度计检测得到的RNA产物量。实际产量会因具体实验条件的不同而产生差异，本图仅供参考。

本试剂盒中的ATP、CTP、GTP和UTP都是单独提供的，以便于添加或置换修饰核苷酸。

一个小包装的本产品可以进行25个20μl体系的体外反转录反应，一个中包装的本产品可以进行100个20μl体系的体外反转录反应。每个反应体系通常可以获得多达80-100μg体外转录的RNA。

-20℃保存，至少一年有效。

由于涉及RNA操作，需要严格按照RNA操作的规范进行，避免RNase污染，相关试剂和耗材需要经过DEPC处理以去除RNase或者确保是RNase free的。

如果希望合成加帽的RNA，须自备Cap analog，如m⁷(3’-O-methyl)-G(5’)ppp(5’)G等。如果希望合成生物素、地高辛、FITC、Cy3等标记的RNA或带有特殊修饰的RNA，相应的修饰NTP需要自备。

本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。

为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。