Annexin V-mCherry细胞凋亡检测试剂盒(Annexin V-mCherry Apoptosis Detection Kit)是用红色荧光蛋白mCherry标记的重组人Annexin V来检测细胞凋亡时出现在细胞膜表面的磷酯酰丝氨酸的一种细胞凋亡检测试剂盒。可以使用流式细胞仪、荧光显微镜或其它荧光检测设备进行检测。

本试剂盒检测的是mCherry红色荧光，mCherry荧光蛋白最大激发光波长为587nm，最大发射光波长为610nm。Annexin V-mCherry荧光蛋白的激发光谱和发射光谱参考图1。

图1. Annexin V-mCherry的激发和发射光光谱。

Annexin是一类广泛分布于真核细胞细胞浆内钙离子依赖的磷酯结合蛋白，参与细胞内的信号转导。但仅Annexin V被报道可以调控一些PKC的活性。

Annexin V选择性结合磷酯酰丝氨酸(phosphatidylserine，简称PS)。磷酯酰丝氨酸主要分布在细胞膜内侧，即与细胞浆相邻的一侧。在细胞发生凋亡的早期，不同类型的细胞都会把磷酯酰丝氨酸外翻到细胞表面，即细胞膜外侧。磷酯酰丝氨酸暴露到细胞表面后会促进凝血和炎症反应。而Annexin V和外翻到细胞表面的磷酯酰丝氨酸结合后可以阻断磷酯酰丝氨酸的促凝血和促炎症反应活性。

Annexin V-mCherry相比藻红蛋白(Phycoerythrin, 简称PE)标记的Annexin V，激发光谱更窄，不会像PE那样在495nm左右产生红色荧光，非常适合与其它绿色荧光一同检测，在进行流式检测时几乎不需要进行任何补偿。

正常细胞不会被Annexin V-mCherry所染色，凋亡细胞和坏死细胞都会被Annexin V-mCherry所染色。如果希望进一步区分凋亡和坏死细胞，可以使用其它细胞凋亡检测试剂盒进行检测。使用本试剂盒检测细胞凋亡的效果参考图2。

图2. Annexin V-mCherry细胞凋亡检测试剂盒检测Jurkat (人T淋巴细胞瘤细胞)细胞凋亡的效果。正常状态的Jurkat细胞在明场下的形态见图A；正常细胞不会被Annexin V-mCherry所染色(图B、D)。Camptothecin诱导4小时后的Jurkat细胞在明场下的形态见图E；凋亡细胞的细胞膜呈红色荧光(图F、H)。实际检测效果会因实验条件、检测仪器的不同而存在差异，本图仅供参考。本试剂盒中不提供Hoechst 33342，如有需要，可向碧云天订购C1028 Hoechst 33342活细胞染色液(100X)。实际检测效果会因实验条件、检测仪器的不同而存在差异，本图仅供参考。

一个小包装的本试剂盒C1069S共可以检测20个样品，中包装的试剂盒C1069M可以检测50个样品，大包装的试剂盒C1069L可以检测100个样品。

-20℃保存，一年有效。Annexin V-mCherry避光保存。

如果有细菌或真菌污染，会严重影响检测效果。

染色后宜尽快检测，时间过长可能会导致凋亡或坏死细胞的数量增加。

如果细胞收集过程中使用了胰酶，需注意设法去除残留的胰酶。残留的胰酶会消化并降解Annexin V-mCherry，最终导致染色失败。

荧光物质均易发生淬灭，在进行荧光观察时，尽量缩短观察时间，同时在操作和存放过程中也尽量注意避光保存。

需自备PBS。

本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。

为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。