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碧云天 BeyoCUBIC 动物组织透明化试剂盒(P0112L)

荧光染色

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  • 商品名称:碧云天 BeyoCUBIC 动物组织透明化试剂盒(P0112L)
  • 商品编号:P0112L
  • 品牌:碧云天
  • 上架时间:2022-10-13
  • 商品毛重:100.100千克
  • 库存: 1188
  • 详细参数>>
产品编号 产品名称 产品包装 产品价格
P0112S BeyoCUBIC™ Animal Tissue Optical Clearing Kit 25ml 237.00元
P0112M BeyoCUBIC™ Animal Tissue Optical Clearing Kit 100ml 758.00元
P0112L BeyoCUBIC™ Animal Tissue Optical Clearing Kit 500ml 2658.00元

碧云天研发生产的BeyoCUBIC™ Animal Tissue Optical Clearing Kit,即BeyoCUBIC™动物组织透明化试剂盒,是一种非常有效地对动物整个身体、整个器官、组织块或类器官等非常简单、便捷、快速地进行高质量、高透明度透明化处理的试剂盒。经本试剂盒透明化处理的动物样品,可以与后续的免疫荧光、免疫组化、常规或荧光染色、生物发光等结合起来,可以实现组织块、类器官、器官甚至整个动物体的三维成像,从而广泛用于生物、医学领域的研究。

CUBIC (Clear, unobstructed brain/body imaging cocktails and computational analysis)是一种简单、有效的动物组织透明化处理方法[1]。碧云天的BeyoCUBIC™ Animal Tissue Optical Clearing Kit和常规的CUBIC透明化效果基本一致。

本试剂盒提供的BeyoCUBIC™-I Solution不仅可以促使组织、器官脱脂,还可以使组织、器官中的血红素脱色。BeyoCUBIC™-II Solution可以调节组织的折射率,使其与溶剂折射率相匹配,尽量减少了组织中的散射光,利于光学成像。本产品进行动物组织透明化的实验流程参考图1。

图1. 碧云天的BeyoCUBIC™ Animal Tissue Optical Clearing Kit (BeyoCUBIC™动物组织透明化试剂盒)对动物组织、器官等进行透明化处理的实验流程图。

本试剂盒实验操作简单便捷。使用本产品提供的试剂简单浸泡动物组织、器官等样品,就可以轻松实现组织器官等样品的透明化,无需使用任何特殊的仪器或设备。

本试剂盒处理的组织器官等样品透明度高。传统的组织透明化方法侧重于均匀化单个组织的不匹配折射率,导致不透明度降低。本试剂盒所使用的透明化试剂BeyoCUBIC™-I Solution具有很强的脱色和脱脂能力,再结合BeyoCUBIC™-II Solution有效调节组织器官等的折光率,使其与溶液的折光率相匹配,以增加组织透光率,能有效实现组织器官等的高透明度。本产品处理的组织器官等,实测透明度通常都优于SCALEVIEW-S、SeeDB2或SeeDB等方法[2]。本产品和Fujifilm/Wako的CUBIC Trial Kit,TCI公司的Tissue Clearing Reagent CUBIC-L [for Animals]与Tissue-Clearing Reagent CUBIC-R+(M) [for Animals]的透明化效果基本一致。本产品和Thermo的CytoVista™ Tissue Clearing Kit与CytoVista™ Tissue Clearing/Staining Kit,Abcam的Tissue Clearing Kit的使用效果相近。

本试剂盒透明化时间短。传统的SCALEVIEW-S或SeeDB2方法组织器官的透明化时间相对都比较长[2]。本试剂盒通常在1-3周就可以轻松实现小鼠组织器官等的透明化。6周龄C57BL/6小鼠不同组织器官透明化实测所需要时间参考下表。实际检测效果会因具体的实验条件不同而存在差异,下表仅供参考。

Organ Brain Heart Liver Lung Intestine Pancreas Kidney
Time 2 weeks 2-3 weeks 2-3 weeks 2-3 weeks 1 week 1 week 2-3 weeks

本试剂盒适用性广。本试剂盒广泛适用于动物组织器官甚至整体的透明化。本试剂盒用于6周龄C57BL/6小鼠不同组织器官透明化的实测效果请参考图2。

图2. 碧云天生产的BeyoCUBIC™ Animal Tissue Optical Clearing Kit用于小鼠组织器官的透明化效果图。本图为6周龄C57BL/6小鼠整脑、肾、脾、腿部肌肉、心脏、小肠截段、胃、肺、白色脂肪、肝、大肠截段、胰腺透明化前后的实拍效果图。图片中每小格的长宽均为1mm,各组织或器官的处理前参数、关键试剂的使用量及时间参考见表1。实际结果会因实验条件、检测仪器等的不同而存在差异,图中效果仅供参考。

表1. 碧云天生产的BeyoCUBIC™ Animal Tissue Optical Clearing Kit对6周龄C57BL/6小鼠组织器官透明化处理前参数、关键试剂的使用量及处理时间参考表。

Organ Brain Kidney Spleen Muscle Heart Small intestine Stomach Lung White fat Liver Large intestine Pancreas
Size Weight (g) 0.55 0.19 0.10 0.33 0.12 0.03 0.19 0.48 0.09 1.38 0.15 0.36
Thickness (mm) ~8 ~4 ~2 ~6 ~3 ~2 ~6 ~5 ~3 ~9 ~2 ~5
50% BeyoCUBIC™-I Solution Volume (ml) 8 5 5 5 5 1.5 5 5 3 10 3 5
Time (h) 4
BeyoCUBIC™-I Solution Volume (ml) 16 20 5 15 20 1.5 15 20 21 30 1.5 5
Time (day) 8 14 3 10 14 1.5 10 14 26 14 1.5 3
Refresh volume (ml) 8 5 5 5 5 1.5 5 5 3 10 3 5
Refresh time Refresh BeyoCUBIC™-I Solution every 4 days
50% BeyoCUBIC™-II Solution Volume (ml) 8 5 5 5 5 1.5 5 5 3 10 3 5
Time (day) 1
BeyoCUBIC™-II Solution Volume (ml) 16 10 10 10 10 3 10 10 6 20 6 10
Time (day) 2
Refresh volume (ml) 8 5 5 5 5 1.5 5 5 3 10 3 5
Refresh time Refresh BeyoCUBIC™-II Solution every day

本试剂盒兼容荧光蛋白和后续的荧光染色。本试剂盒在使用过程中可以充分保护荧光蛋白的稳定性,不会导致EGFP、EYFP、mCherry等荧光蛋白的变性而失去荧光。用于6周龄C57BL/6小鼠组织器官透明化处理后的DAPI染色效果请参考图3。

图3. 碧云天BeyoCUBIC™ Animal Tissue Optical Clearing Kit用于6周龄小鼠脑和小肠透明化处理后的DAPI染色效果图。图A为6周龄C57BL/6小鼠整脑DAPI染色4倍镜下实拍效果图。图a和b分别为前脑和中脑40倍镜下局部实拍效果图。图B为6周龄C57BL/6小鼠小肠截段DAPI染色4倍镜下实拍效果图。图c和d分别为小肠绒毛和表面40倍镜下实拍效果图。比例尺均为100µm。实际结果会因实验条件、检测仪器等的不同而存在差异,图片效果仅供参考。

包装清单:
产品编号 产品名称 包装
P0112S-1 BeyoCUBIC™-I Solution 25ml
P0112S-2 BeyoCUBIC™-II Solution 25ml
P0112S-3 100X Wash Buffer 3ml
P0112S-4 Mounting Solution 10ml
说明书 1份

产品编号 产品名称 包装
P0112M-1 BeyoCUBIC™-I Solution 100ml
P0112M-2 BeyoCUBIC™-II Solution 100ml
P0112M-3 100X Wash Buffer 12ml
P0112M-4 Mounting Solution 40ml
说明书 1份

产品编号 产品名称 包装
P0112L-1 BeyoCUBIC™-I Solution 500ml
P0112L-2 BeyoCUBIC™-II Solution 500ml
P0112L-3 100X Wash Buffer 60ml
P0112L-4 Mounting Solution 200ml
说明书 1份
保存条件:

-20℃保存,一年有效。BeyoCUBIC™-I Solution和BeyoCUBIC™-II Solution须-20℃避光保存;100X Wash Buffer可以4℃保存;Mounting Solution可以室温或4℃保存。

注意事项:

BeyoCUBIC™-I Solution和BeyoCUBIC™-II Solution使用前,需室温静置至完全融化,确保液体透明并且没有沉淀。如果有晶体析出或溶液不透明,可以短时间置于55℃水浴溶解至完全透明并且没有沉淀。

BeyoCUBIC™-I Solution和BeyoCUBIC™-II Solution在高温(>75℃)下失效,注意不可高温处理。

BeyoCUBIC™-I Solution处理后组织会变软,请使用勺子小心取样,不要使用镊子,以免损伤组织。

BeyoCUBIC™-I Solution很容易清除掉油性笔迹。使用时请尽量盖紧盖子,并用Parafilm密封盖子,防止漏液。建议同时在管盖和管体上进行样品标记,以免样品信息丢失。

BeyoCUBIC™-I Solution处理过程中如果出现浓烈的氨气气味,提示溶液可能已经失效,请及时更换新鲜的BeyoCUBIC™-I Solution,以免影响透明化效果。

BeyoCUBIC™-II Solution使用时请勿剧烈摇晃,避免产生气泡。如果不慎导致BeyoCUBIC™-II Solution中产生大量气泡,请采用超声波清洗机处理或抽真空处理(~0.1 MPa, ~30min)以去除气泡,或室温静置(至少7-8小时)使气泡自行消除,以免导致组织器官周围或内部出现气泡。

BeyoCUBIC™-II Solution较粘稠,使用时请使用大口枪头(可自行用剪刀剪去枪头尖端)缓慢吸取,并缓慢加入至样品中,请勿剧烈吹打,避免产生大量气泡。

完成照片和视频拍摄后的组织器官样品可以去除Mounting Solution,然后可以浸泡在BeyoCUBIC™-II Solution中室温保存1周。时间越长,样品透明度越高,但也会导致组织膨胀。完成照片和视频拍摄后的样品可以采用1X Wash Buffer清洗,再用30% (w/v)蔗糖溶液脱水,然后用O.C.T化合物包埋,并在-80℃长期保存。

对于较厚的切片(>2mm)或整个器官,每一步的孵育时间可以根据实际的透明化效果适当延长。

为了保证BeyoCUBIC™-I Solution和BeyoCUBIC™-II Solution长期有效,需要-20℃避光保存。但使用时,为了方便观察组织透明化效果,可以在非严格避光条件下对样品进行透明化处理。

本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。

为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

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