- 规格参数
- 产品介绍
- 售后保障
- 商品评价
- 仓储包装
- 常见问题
碧云天 pCMV-MCS-P2A-mCh... 当商品进行补货时,我们将以短信、邮件的形式通知您,最多发送一次,不会对您造成干扰。 |
数量: | |
手机号码: | |
电子邮箱: | |
产品编号 | 产品名称 | 产品包装 | 产品价格 |
D2824-1μg | pCMV-MCS-P2A-mCherry-HA-Pur | 1μg | 888.00元 |
D2824-100μg | pCMV-MCS-P2A-mCherry-HA-Pur | 100μg | 1169.00元 |
pCMV-MCS-P2A-mCherry-HA-Pur是碧云天研发的用于在哺乳动物细胞中同时表达目的蛋白、红色荧光蛋白mCherry和嘌呤霉素(Puromycin)抗性基因的表达质粒。
本质粒含有的CMV启动子可以高效启动目的基因的表达,同时可以通过P2A共表达红色荧光蛋白mCherry,便于通过mCherry的荧光特性监测目的蛋白的表达情况。本质粒的表达效果可以参考图1。
图1. 碧云天pCMV-MCS-P2A-mCherry-HA-Pur质粒使用Lipo8000™转染试剂(C0533)转染293T细胞后的表达效果图。左侧为明场照片,右侧为荧光照片。本图仅供参考,实际拍摄效果会因具体实验条件的不同而有所不同。
本质粒在多克隆位点和mCherry的编码序列之间含有P2A肽序列。P2A是一个可以被理解为含有19个氨基酸残基(ATNFSLLKQAGDVEENPGP)的“自剪切”小肽。但实际的过程并不是发生自剪切,而是使核糖体跳过P2A等2A元件C端的甘氨酸和脯氨酸肽键的合成而发挥作用,最终导致2A序列末端和下游产物分离。上游目的基因表达蛋白的C端将会添加一些额外的P2A残基(GSGATNFSLLKQAGDVEENPG),而下游蛋白的N端将会有额外的脯氨酸。在P2A肽的N端加入GSG序列,可提高剪切效率 [1,2]。
本质粒为氨苄青霉素(Ampicillin)和嘌呤霉素(Puromycin)抗性。可利用其氨苄青霉素抗性,转化大肠杆菌后筛选阳性克隆。转染哺乳动物细胞后,可使用Puromycin (ST551)筛选稳定表达目的蛋白的细胞株。
pCMV-MCS-P2A-mCherry-HA-Pur质粒的主要信息如下:
Feature Nucleotide | Position |
AmpR | 63-923 |
AmpR promoter | 924-1016 |
CMV enhancer | 1101-1404 |
CMV promoter | 1405-1608 |
T3 promoter | 1654-1672 |
P2A | 1769-1834 |
mCherry | 1835-2542 |
HA | 2549-2575 |
T7 promoter | 2630-2648 |
SV40 poly(A) signal | 2922-3043 |
f1 ori | 3050-3505 |
AmpR promoter | 3532-3636 |
SV40 promoter | 3638-3995 |
SV40 ori | 3846-3981 |
PuroR | 4030-4629 |
HSV TK poly(A) signal | 4861-4908 |
ori | 5237-5825 |
pCMV-MCS-P2A-mCherry-HA-Pur质粒(5933bp)的图谱如下:
pCMV-MCS-P2A-mCherry-HA-Pur的多克隆位点的详细图谱如下: https://www.beyotime.com/Manual/D2824 pCMV-MCS-P2A-mCherry-HA-Pur.pdf 。
pCMV-MCS-P2A-mCherry-HA-Pur中没有的酶切位点包括:
AarI | AbsI | AcvI | AfeI | AgeI | AhlI | Aor51HI |
AscI | AsiGI | AsiSI | BaeI | BbrPI | BcuI | BlpI |
BoxI | Bpu1102I | BshTI | Bsp68I | Bsp1720I | BspQI | BssNAI |
Bst1107I | BstENI | BstPAI | BstZ17I | BtuMI | CelII | CspAI |
Eco47III | Eco72I | EcoNI | FseI | FspAI | I-CeuI | I-PpoI |
I-SceI | LguI | MauBI | MreI | MssI | NruI | PalAI |
PciSI | PI-PspI | PI-SceI | PinAI | PmaCI | PmeI | PmlI |
PpuMI | PshAI | Psp5II | PspCI | PspPPI | PspXI | PsrI |
RgaI | RigI | SanDI | SapI | SfaAI | SgfI | SgrDI |
SgsI | SmiI | SpeI | SwaI | XagI |
pCMV-MCS-P2A-mCherry-HA-Pur中的单酶切位点包括:
AccI | GT`MK,AC | 1752 | MfeI | C`AATT,G | 2908 |
AflII | C`TTAA,G | 2574 | MluI | A`CGCG,T | 3044 |
ApaI | G,GGCC`C | 2583 | NdeI | CA`TA,TG | 1274 |
BamHI | G`GATC,C | 1721 | NheI | G`CTAG,C | 1631 |
BbsI | GAAGACNN`NNNN, | 2270 | NotI | GC`GGCC,GC | 1702 |
BbvCI | CC`TCA,GC | 2373 | PaeR7I | C`TCGA,G | 1763 |
BclI | T`GATC,A | 2815 | PciI | A`CATG,T | 5881 |
BfuAI | ACCTGCNNNN`NNNN, | 4681 | PflFI | GACN`N,NGTC | 4072 |
BglII | A`GATC,T | 1757 | PflMI | CCAN,NNN`NTGG | 2274 |
BmgBI | CAC|GTC | 1813 | PspOMI | G`GGCC,C | 2579 |
BmtI | G,CTAG`C | 1635 | RsrII | CG`GWC,CG | 4146 |
BsgI | GTGCAGNNNNNNNNNNNNNN,NN` | 2429 | SacI | G,AGCT`C | 1689 |
BsiWI | C`GTAC,G | 4086 | SalI | G`TCGA,C | 1751 |
BspDI | AT`CG,AT | 3998 | SbfI | CC,TGCA`GG | 2190 |
BspEI | T`CCGG,A | 4143 | ScaI | AGT|ACT | 616 |
BspMI | ACCTGCNNNN`NNNN, | 4681 | SfiI | GGCCN,NNN`NGGCC | 3933 |
BsrGI | T`GTAC,A | 2535 | SgrAI | CR`CCGG,YG | 2516 |
BssHII | G`CGCG,C | 4485 | SmaI | CCC|GGG | 1716 |
BstBI | TT`CG,AA | 4645 | SnaBI | TAC|GTA | 1380 |
BstXI | CCAN,NNNN`NTGG | 1697 | SrfI | GCCC|GGGC | 1716 |
ClaI | AT`CG,AT | 3998 | TspMI | C`CCGG,G | 1714 |
CspCI | ,NN`(N)11CAANNNNNGTGG(N)10,NN` | 1416 | Tth111I | GACN`N,NGTC | 4072 |
Eco53kI | GAG|CTC | 1687 | XbaI | T`CTAG,A | 2543 |
EcoRI | G`AATT,C | 1739 | XcmI | CCANNNN,N`NNNNTGG | 2521 |
EcoRV | GAT|ATC | 1747 | XhoI | C`TCGA,G | 1763 |
HindIII | A`AGCT,T | 1727 | XmaI | C`CCGG,G | 1714 |
HpaI | GTT|AAC | 2921 | XmnI | GAANN|NNTTC | 735 |
pCMV-MCS-P2A-mCherry-HA-Pur质粒中对插入片段进行测序时,推荐使用的正向测序引物T3和反向测序引物mCherry primer的序列如下:
T3 primer (1654-1672): 5' AATTAACCCTCACTAAAGG 3'
mCherry primer (1837-1853): 5' CCTCGCCCTTGCTCACC 3'
pCMV-MCS-P2A-mCherry-HA-Pur的全序列信息:D2824 pCMV-MCS-P2A-mCherry-HA-Pur 全序列.txt
包装清单:产品编号 | 产品名称 | 包装 |
D2824-1µg | pCMV-MCS-P2A-mCherry-HA-Pur | 1µg |
D2824-100µg | pCMV-MCS-P2A-mCherry-HA-Pur | 100µg |
— | 说明书 | 1份 |
-20℃保存。
注意事项:本质粒未经碧云天书面许可不得用于任何商业用途,也不得移交给订货人所在实验室外的任何个人或单位。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
由本网站发货的订单,在订单打印之前可以修改,打开“订单详情”页面,点击右上角的“修改订单”即可,若没有修改订单按钮,则表示订单无法修改。
您可以通过以下方法获取商品的到货时间:若商品页面中,显示“无货”时:商品具体的到货时间是无法确定的,您可以通过商品页面的“到货通知”功能获得商品到货提醒。
如订单处于暂停状态,进入“我的订单"页面,找到要取消的订单,点击“取消订单”按钮。
本网站所售商品都是正品行货,均开具正规发票(图书商品用户自由选择是否开发票),发票金额含配送费金额,另有说明的除外。
在商品页面右则,您可以看到卖家信息,点击“联系客服”按钮,咨询卖家的在线客服人员,已开通400电话的卖家,您可直接致电卖家。
同个订单购买多个商品可能会分为一个以上包裹发出,可能不会同时送达,建议您耐心等待1-2天,如未收到,本网站自营商品可直接联系中翼在线客服,第三方商家商品请联系商家在线客服。
登陆网站,进入“我的订单”,点击客户服务下的返修/退换货或商品右则的申请返修/退换货,出现返修及退换货首页,点击“申请”即可操作退换货及返修,提交成功后请耐心等待,由专业的售后工作人员受理您的申请。
一般情况下,退货处理周期(不包含检测时间):自接收到问题商品之日起 7 日之内为您处理完成,各支付方式退款时间请点击查阅退款多久可以到账; 换货处理周期:自接收到问题商品之日起 15 日之内为您处理完成; 正常维修处理周期:自接收到问题商品之日起 30 日内为您处理完成。
好评度