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碧云天 BsaI(限制性内切酶)(D6128M)

mRNA疫苗相关

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  • 商品名称:碧云天 BsaI(限制性内切酶)(D6128M)
  • 商品编号:D6128M
  • 品牌:碧云天
  • 上架时间:2022-12-12
  • 商品毛重:100克
  • 库存: 65535
  • 详细参数>>
产品编号 产品名称 产品包装 产品价格
D6128S BsaI 1kU 198.00元
D6128M BsaI 5kU 758.00元
D6128L BsaI 20kU 2368.00元
D6128XL BsaI 200kU 16568.00元

碧云天生产的BsaI是一种IIS类限制性内切酶,是由碧云天自主研发的PerfectProtein™技术平台表达、纯化获得的重组内切酶,常用于Golden Gate组装(Golden Gate Assembly)以及mRNA疫苗用质粒的线性化或其它体外转录质粒的线性化。

BsaI限制性内切酶的基本信息如下:

识别序列 缓冲液兼容性(%) 酶切温度 失活条件 甲基化干扰?
5'-GGTCTC(N)1^-3' 1X BsaI 1X B 1X G 1X O 1X R 1X Y 2X Y 37℃* 80℃ 20min
3'-CCAGAG(N)5^-5' 100 25-100 50-100 75-100 100 100 100

*,37℃孵育3h未表现星号活性,延时酶切可能出现星号活性。

碧云天生产的BsaI切割含有其酶切位点的DNA片段的效果请参考图1。

图1. 碧云天生产的BsaI (D6128)和N公司的同类产品(Competitor BsaI)的酶活性检测效果对比图。使用本产品或国外N公司的BsaI,在20µl反应体系中加入图中指定量的本产品或国外N公司的BsaI,37℃孵育30分钟进行酶切反应,然后电泳分析,最终进行核酸染色和荧光成像分析。如图所示,本产品与N公司的产品相比,具有类似的酶切效果。反应体系(20μl): 50mM Potassium Acetate, 20mM Tris-acetate (pH 7.9 @ 25℃), 10mM Magnesium Acetate, 100µg/ml BSA,100ng dsDNA以及1µl不同浓度的BsaI。图中DNA底物的制备方法:以pUC18 (D2303)为模板,用引物5'-AACTTGGTCTGACAGTTA-3'和5'-ATTAACTGGCGAACTAC-3'进行扩增获得含一个BsaI位点的300bp DNA片段。实际检测效果会因实验条件、检测仪器等的不同而存在差异,图中数据仅供参考。

酶储存液:10mM Tris-HCl, 200mM NaCl, 1mM DTT, 0.1mM EDTA, 200µg/ml BSA, 50% Glycerol, pH 7.4 @ 25℃.

1X Buffer BsaI:50mM Potassium Acetate, 20mM Tris-acetate, 10mM Magnesium Acetate, 100µg/ml BSA, pH 7.9 @ 25℃.

1X Buffer R:10mM Tris-HCl (pH8.5 @ 37℃), 10mM MgCl2, 100mM KCl, 0.1mg/ml BSA.

酶切和连接效率:20倍过量的本内切酶消化1小时,>95%被酶切的片段可以被连接并被重新酶切(Recut)。

活性单位定义:One unit is defined as the amount of enzyme required to digest 1µg of pXba DNA in 1 hour at 37℃ in a total reaction volume of 50µl.

包装清单:
产品编号 产品名称 包装
D6128S-1 BsaI (20U/µl) 50µl
D6128S-2 10X Buffer BsaI 0.2ml
D6028S-3 10X Buffer R 1ml
说明书 1份

产品编号 产品名称 包装
D6128M-1 BsaI (20U/µl) 250µl
D6128M-2 10X Buffer BsaI 1ml
D6128M-3 10X Buffer R 1ml
说明书 1份

产品编号 产品名称 包装
D6128L-1 BsaI (200U/µl) 100µl
D6128L-2 10X Buffer BsaI 4ml
D6128L-3 10X Buffer R 1ml
说明书 1份

产品编号 产品名称 包装
D6128XL-1 BsaI (200U/µl) 1ml
D6128XL-2 10X Buffer BsaI 40ml
D6128XL-3 10X Buffer R 1ml
说明书 1份
保存条件:

-20℃保存。

注意事项:

内切酶使用时宜存放在冰盒内或冰浴上,使用完毕后宜立即放置于-20℃保存。

温度在50℃时酶切活性可达100%。

如果发现预期的酶切位点不能切开,请确认是否存在甲基化干扰问题。Dcm甲基化与酶切位点的重叠组合会阻断酶切,CpG甲基化与酶切位点的重叠组合也会阻断酶切。

甘油含量大于5%可能会导致星号活性。

3小时孵育未表现星号活性,延时酶切可能出现星号活性。

本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。

为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

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