碧云天的BeyoGel™ EMSA PAGE预制胶(BeyoGel™ EMSA Precast PAGE Gel)是一种使用安全、便捷、高品质的常规尺寸聚丙烯酰胺预制凝胶，适用于EMSA (Electrophoretic mobility shift assay)实验。本预制胶有1.5厘米高的浓缩胶，具有非常优良的分离效果，电泳后条带平整、清晰、细腻、锐利，几乎没有边缘效应；同时本预制胶胶板为玻璃材质，减少了对蛋白的非特异性吸附，电泳效果非常好，达到甚至超过了自配EMSA PAGE胶的电泳效果。

碧云天的BeyoGel™ EMSA PAGE预制胶有10孔和15孔两种孔数，4%和6%两种不同浓度的固定浓度胶可供选择。如果有较大量的特殊浓度需求，碧云天可提供定制服务。每种预制胶的参数请参考下表：

本预制胶含有1.5厘米高的4%浓缩胶，可以有效确保获得非常锐利的条带。

本预制胶丙烯酰胺(Acrylamide)与甲叉丙烯酰胺(Bisacrylamide)的比例为29:1，凝胶厚度为1.5mm。加样孔数为10孔的最大上样量为60μl，加样孔数为15孔的最大上样量为30μl。胶板尺寸：宽×高×厚度为98×84×4.1mm；凝胶尺寸：宽×高×厚度为81×74×1.5mm。

聚丙烯酰胺凝胶电泳(Polyacrylamide gel electrophoresis, PAGE)技术广泛用于蛋白质、核酸及蛋白质-核酸复合物的分离纯化、检测、鉴定、分子量分析等实验，是生命科学研究中最基本的实验技术之一。常见的Western印迹(Western blot)检测就是基于PAGE的。

凝胶迁移实验(也称凝胶阻滞实验或电泳迁移率实验) (Electrophoretic mobility shift assay, EMSA)，也称Gel Shift，是一种用于蛋白与核酸相互作用的技术。最初是用于转录因子与启动子相互作用的验证性实验，也可应用于蛋白-DNA、蛋白-RNA相互作用研究。EMSA技术基于进行非变性聚丙烯酰胺或琼脂糖凝胶电泳时，蛋白质-DNA复合物的迁移速度比游离线性DNA片段慢，从而导致DNA迁移率在与蛋白质结合时减慢[1,2]。EMSA分辨蛋白质-DNA复合物的能力在很大程度上取决于复合物在实验步骤中的稳定性。电泳缓冲液相对较低的离子强度有助于稳定瞬时相互作用，可以通过该方法分析不稳定的复合物。此外，EMSA也可以解决某些蛋白质因子结合导致的DNA构象改变或弯曲。EMSA不局限于蛋白质与DNA的相互作用，也可用于蛋白质-RNA和蛋白质-蛋白质的相互作用的研究[3,4]。

EMSA作为研究基因调控和确定蛋白质-DNA相互作用的一项重要技术有如下优点。DNA结合蛋白的来源可以是细胞核或全细胞提取物、体外翻译产物或分离纯化的蛋白；可以定性地用于鉴定裂解物中的序列特异性DNA结合蛋白(如转录因子) [5]，并结合相应DNA序列上的点突变来鉴定特定基因上游调控区内的重要结合序列；还可用于定量测量热力学和动力学参数。

碧云天的BeyoGel™ EMSA PAGE预制胶使用略偏碱性pH的TBE缓冲液制备。

本预制胶使用常用的0.5X TBE电泳液，推荐使用碧云天TBE (1X premixed powder) (ST720/ST721)、TBE (5X premixed powder) (ST723)以及TBE (5X) (ST718)，或参考使用说明自行配制相应的电泳液。

关于10孔和15孔预制胶的选择：需要检测的样品数量多或者需要定量时，推荐使用15孔预制胶，通量更大、更便于进行较多样品的定量统计分析；需要获得非常漂亮的代表性图片时，推荐使用10孔预制胶，10孔预制胶获得的条带更加平整和锐利。

本产品使用安全、便捷。本预制胶无需配制，即开即用，去掉梳子即可上样，而传统的EMSA PAGE配制凝胶繁琐费时，并且制胶时还会接触有毒和刺激性试剂。

本产品质量稳定。本预制胶采用高品质玻璃胶板，和塑料胶板相比，大大减少了胶板对蛋白的吸附，电泳效果更好。本产品流水线灌注，品质稳定可靠，重复性好，不同批次的产品一致性高。

本产品电泳效果好。本预制胶的蛋白质-核酸复合物分离效果极佳，非常适合低丰度蛋白的检测。

本产品电泳槽兼容性好。本预制胶兼容市场上主流的小型电泳槽，如碧云天的MiniProGel™蛋白制胶与电泳系统(E6001/E6005)、Bio-Rad公司的Mini-PROTEAN® Tetra Cell电泳槽、Life公司的XCell SureLock® Mini-Cell电泳槽(需与碧云天可免费提供的特制挡板配合使用)、以及上海天能、北京六一等的mini胶电泳槽或其它胶板宽度在10厘米的电泳槽。

本产品电泳时间短。本预制胶最快30分钟即可完成电泳，推荐的电泳电压和电泳时间为100V 30-90分钟，即可完成电泳并获得非常平整和锐利的电泳条带。具体的电泳时间取决于凝胶浓度。

本产品取出凝胶极为便捷。只需用刀片在玻璃胶板一侧轻轻划一下即可，并且玻璃胶板打开极为方便，无需特殊的起撬工具。

本预制胶属于特殊用途预制胶。碧云天的特殊用途预制胶的比较和选择可以参考碧云天的相关网页：

http://www.beyotime.com/support/special-precast-page-gel.htm。

4℃保存，1-2个月有效。切勿置于0℃以下冷冻。

由于本预制胶保质期较短，需新鲜制备，在您确认订购后约3-5个工作日才能发货。

本预制胶不能置于0℃以下冷冻，否则凝胶会冻裂。

电泳液建议新鲜配制。试剂纯度不够、反复使用或长期放置的缓冲液会降低电泳效果。电泳缓冲液多次使用后，离子强度降低，pH值上升，缓冲性能下降，可能使电泳产生条带模糊和不规则的DNA带迁移的现象。

本预制胶为了兼容几乎所有厂家的小型凝胶电泳槽，所以改进了与电泳槽U型硅橡胶密封条的吻合结构(如碧云天、Bio-Rad等公司的电泳槽)。建议在电泳时须将具有突起结构的U型硅橡胶密封条取出后反过来安装，使其没有突起的平滑面朝外，从而防止漏液，见下图。一般内槽电泳液加满，外槽电泳液没过电泳槽底部的阳极即可，并且电泳结束后的电泳缓冲液可以作为外槽缓冲液重复使用1-2次。另外，部分公司都已经配套无突起结构的U型硅橡胶密封条，使用这样的U型硅橡胶密封条就不会出现内外槽之间的漏液现象。

图1. 碧云天、Bio-Rad等公司的电泳槽U型硅橡胶密封条的突起结构图。由于碧云天的BeyoGel™ PAGE预制胶的该部位是平的，使其兼容几乎所有厂家的小型胶电泳槽，所以电泳时须将具有突起结构的硅橡胶密封条(左图)取出后反过来安装(右图)，使其没有突起的平滑面朝外，从而防止漏液。

由于碧云天的BeyoGel™ PAGE预制胶比Life公司的XCell SureLock® Mini-Cell电泳槽配套的NuPAGE® Gel或Novex® Mini Gel略薄，所以需加特制挡板配合使用。如有需要，请在订购本产品时告知，碧云天会免费赠送该特制挡板。

本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。

为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。