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碧云天 重组SENP_EUH蛋白酶(His-tag)(P2314-10KU)

蛋白纯化

售价¥ 降价通知

市场价¥3668
  • 商品货号
    P2314-10KU
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  • 商品名称:碧云天 重组SENP_EUH蛋白酶(His-tag)(P2314-10KU)
  • 商品编号:P2314-10KU
  • 品牌:碧云天
  • 上架时间:2023-01-11
  • 商品毛重:100.100千克
  • 库存: 11632
  • 详细参数>>
产品编号 产品名称 产品包装 产品价格
P2314-500U 重组SENPEUH蛋白酶(His-tag) 500U 321.00元
P2314-2KU 重组SENPEUH蛋白酶(His-tag) 2KU 968.00元
P2314-10KU 重组SENPEUH蛋白酶(His-tag) 10KU 3668.00元
P2314-50KU 重组SENPEUH蛋白酶(His-tag) 50KU 12858.00元

碧云天生产的重组SENPEUH蛋白酶(His-tag),即Recombinant SENPEUH (His-tag)或rSENPEUH (His-tag),是一种通过E. coli 重组表达经人工改造的新型SENP蛋白酶,理论分子量为25.7kDa,主要用于切除酵母或真核细胞体系融合表达的重组蛋白的SUMOEU1标签。

SUMOEU1标签作为SUMO的突变体,在酵母和真核细胞中可以提高目的蛋白的可溶性和稳定性,而且SUMOEU1标签融合的目的蛋白不参于SUMO相关的细胞调控,也不会被内源性的去SUMO化酶切割,因此SUMOEU1标签适用于酵母和真核细胞重组蛋白的表达和纯化。rSENPEUH高度特异性地识别并切割SUMOEU1标签,实现SUMOEU1标签与目的蛋白的高效分离,切割后的目的蛋白不带有任何相应标签氨基酸的残留[1]。

本产品N端带有His-tag,可以通过相应的His抗体琼脂糖凝胶、磁珠或镍柱吸附去除。

本产品酶切SUMOEU1标签融合蛋白的效果参考图1。

图1. 碧云天生产的重组SENPEUH蛋白酶(His-tag) (P2314)酶切SUMOEU1-MBP蛋白的效果图。在30μl反应体系中,加入10µg SUMOEU1-MBP及相应量的本品,25℃孵育1小时后,加入7μl SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(5X) (P0015),95℃加热5分钟,使用BeyoGel™ Plus PAGE预制胶(P0520)进行电泳检测,BeyoBlue™考马斯亮蓝超快染色液(P0017F)进行染色,可以观察到随着重组SENPEUH蛋白酶的酶量增加,SUMOEU1-MBP被酶切的越来越完全。实际效果会因样品种类、检测仪器等的不同而存在差异,图中效果仅供参考。

本产品的基本信息如下表:

蛋白信息(About this protein)
名称(Name) 重组SENPEUH蛋白酶(His-tag)
别名(Synonyms) SENP1EU, SENPEU, rSENPEUH
分子量(kDa) 25.7kDa
外观(Physical appearance) 液体
活性(Biological activity) 10U/μl
活力单位(Unit definition) One unit is defined as the amount of enzyme required to digest 10µg of SUMOEU1-MBP protein in 1 hour at 25℃, to the extent that the accumulation of SUMOEU1 tag and MBP as determined by SDS-PAGE.
纯度(Purity) ≥95% by SDS-PAGE, other protease activity not detected.
储存液(Storage buffer) 5mM Tris (pH7.4), 250mM NaCl, 5mM DTT, 50% Glycerol
产品用途(Applications) 切除酵母或真核细胞体系等融合表达的重组蛋白的SUMOEU1标签。

rSENPEUH最佳酶切温度为25℃,在较宽的pH范围(6.0-10.0)、较宽的温度范围(2-37℃)、较宽的离子强度范围(0-1M NaCl,0-500mM Imidazole)内均具有较高的酶活性。在实际操作过程中,建议4℃酶切过夜以尽可能保持重组蛋白的活性。rSENPEUH在0.5-2mM DTT存在的情况下酶活性更高,建议酶切体系中加入适当浓度的DTT以提高酶切效率。

rSENPEUH的酶活性不会被常见的丝氨酸蛋白酶抑制剂(Serine protease inhibitor)如PMSF、AEBSF、Bestatin、Pepstatin、E-4、TLCK和EDTA所抑制。但靶向半胱氨酸(Cysteine)残基的蛋白酶抑制剂如NEM或IAA等,可以显著抑制rSENPEUH的酶活力。

本产品用于移除重组蛋白SUMOEU1标签的酶切反应时,如果按照100μg SUMOEU1标签融合的重组蛋白使用1μl rSENPEUH (10U/μl),并4℃酶切过夜,本产品的500U、2KU、10KU和50KU包装,分别可用于约5mg、20mg、100mg和500mg带有SUMOEU1标签融合重组蛋白的酶切。

包装清单:
产品编号 产品名称 包装
P2314-500U rSENPEUH (His-tag, 10U/μl) 50μl
P2314-2KU rSENPEUH (His-tag, 10U/μl) 200μl
P2314-10KU rSENPEUH (His-tag, 10U/μl) 1ml
P2314-50KU rSENPEUH (His-tag, 10U/μl) 1ml×5
说明书 1份
保存条件:

-20℃保存,两年有效。

注意事项:

本产品含50%甘油,-20℃保存不会冻结。须避免-80℃保存,冻融可能会降低本产品的酶活性。

本产品较为粘稠,吸取时需注意取样量准确,加样后请注意充分吹打混匀,避免产生气泡。

本产品的酶活性与SUMOEU1标签和目的蛋白形成的融合蛋白的空间结构有较大的相关性,实测对于一些SUMOEU1标签融合蛋白的活性可以达到说明书标注的活性,但对于某些SUMOEU1标签融合蛋白的酶切活性会差别比较大。对于遇到本产品酶活性相对较低的情况,需要大幅度加大酶的用量。如果希望获得更高的酶切活性,此时建议在许可的范围内适当增减或变更目的蛋白与SUMOEU1标签连接处的氨基酸序列,以获得更好的酶切效果。

本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。

为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

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