碧云天生产的BeyoLytic™细菌活性蛋白抽提试剂(BeyoLytic™ Bacterial Active Protein Extraction Reagent)，也称BeyoLytic™ Bacterial Native Protein Extraction Reagent，是一种无需超声或高压破碎，能快速、高质量、高产量、高活性地直接裂解并抽提大肠杆菌表达的重组蛋白以及大肠杆菌自身表达的可溶性蛋白的细菌活性蛋白提取试剂。本产品非常适合快速高通量的蛋白表达和筛选。本产品不仅可以用于抽提可溶性蛋白，也可以用于洗涤去除粘附在包涵体表面的细胞碎片以获得高纯度的包涵体蛋白。需要注意的是，本产品不能溶解包涵体。

本产品与Sigma的CelLytic™ B (B7435)、CelLytic™ B Plus Kit (CB0500/CB0050)，Thermo的B-PER^® Bacterial Protein Extraction Reagent (78243/78248/90084)、B-PER^® II Bacterial Protein Extraction Reagent (78260)、B-PER^® Direct Bacterial Protein Extraction Kit (90080/90081)、B-PER™ with Enzymes Bacterial Protein Extraction Kit (90078/90079)等非常相近，使用效果和用途也非常相近，很多时候可以考虑相互替代。

本产品经过优化，适用于BL21菌，也同样适用于DH5ɑ、JM109以及其它类似的细菌。

本产品是一种含有特定的经过精心筛选以确保蛋白抽提效果良好的比较温和的非变性去垢剂(detergent)的缓冲液(含40mM Tris, pH8.0)。所提取的蛋白通常能很好地保持蛋白原有的结构和生物学活性，可用于多种生物化学和分子生物学用途，兼容常见下游实验操作如His或GST等标签蛋白的纯化、ELISA、Western blot、IP、酶活性检测、荧光蛋白检测等。

本产品能通过一步法快速(15min)有效地裂解细菌、抽提细菌细胞质和细胞核内的蛋白，提取过程中无需繁琐的超声或者高压破菌(French press)操作。与超声破碎法、高压破菌法和溶菌酶处理等方法相比，本产品通常能获得更高产量和更高活性的可溶性目的蛋白。

BeyoLytic™细菌活性蛋白抽提试剂裂解表达GST-EGFP的BL21(DE3)的效果可参照图1。

图1.BeyoLytic™细菌活性蛋白抽提试剂对于细菌的裂解效果图。A. 表达EGFP蛋白的细菌不同裂解时间抽提产物的荧光强度。20mg表达GST-EGFP的BL21(DE3)菌体在加入1ml BeyoLytic™细菌活性蛋白抽提试剂，裂解指定时间后取上清检测荧光强度。图中可见，裂解15min时达到平台期。B. 对应A图中不同裂解时间点，蛋白在上清和沉淀中的分布情况。泳道1、3、5、7、9、11、13依次是裂解1、2、5、10、15、20和30min的上清；泳道2、4、6、8、10、12、14依次是裂解1、2、5、10、15、20和30min的沉淀。图中可见，裂解15min后，GST-EGFP在上清和沉淀的分布比例基本不变。图中数据仅供参考，实际的检测效果会因具体的实验条件不同而有所不同。

使用本产品获得的蛋白样品可用碧云天生产的BCA蛋白浓度测定试剂盒(P0009/P0010/P0010S/P0011/P0012/P0012S)或Bradford蛋白浓度测定试剂盒(去垢剂兼容型) (P0006C)进行定量分析。

BeyoLytic™细菌活性蛋白抽提试剂与超声破碎法裂解表达GST-EGFP的BL21 (DE3)的效果比较请参考图2。

图2.BeyoLytic™细菌活性蛋白抽提试剂与超声破碎法裂解细菌的效果比较图。A. 表达GST-EGFP的细菌用超声法和本产品裂解不同时间获得的抽提产物的荧光强度。20mg表达GST-EGFP的BL21(DE3)菌体在加入1ml BeyoLytic™细菌活性蛋白抽提试剂，裂解指定时间后取上清检测荧光强度；20mg表达GST-EGFP的BL21(DE3)菌体在加入1ml PBS，之后超声破碎指定时间后取上清检测荧光强度。B. 对应A图中使用BeyoLytic™细菌活性蛋白抽提试剂抽提的不同时间点，蛋白在上清和沉淀中的分布情况。泳道1、3、5、7依次是抽提5min、10min、15min和20min的上清；泳道2、4、6、8依次是抽提5min、10min、15min和20min的沉淀。C. 对应A图中不同超声时间点，蛋白在上清和沉淀中的分布情况。泳道1、3、5、7、9依次是抽提2min、5min、10min、15min和20min的上清；泳道2、4、6、8、10依次是抽提2min、5min、10min、15min和20min的沉淀。图中可见，BeyoLytic™细菌活性蛋白抽提试剂的抽提效果显著优于超声破碎法。图中数据仅供参考，实际的检测效果会因具体的实验条件不同而有所不同。

室温保存，2年有效。 4℃或-20℃可以保存更长时间。

可以考虑选购蛋白酶抑制剂混合物(细菌抽提用, 100X) (P1025/P1026)、蛋白酶抑制剂混合物(His-Tag蛋白纯化用, 100X) (P1030/P1031)或PMSF (100mM) (ST506)，并添加到本产品中以抑制蛋白降解。可以考虑选购BeyoZonase™超级核酸酶(D7121/D7126)，并添加到本产品中以降低抽提产物的粘稠度。

本产品采用Tris-HCl缓冲系统，蛋白提取后的相关纯化操作，可以使用相同的缓冲系统。

对于特殊的菌株，如果抽提效果不太理想，可以考虑进行冻融处理。冻融处理通常可进一步提高产品的蛋白抽提效果。

如果使用本产品抽提得到的样品需要使用金属螯合纯化柱进行纯化，通常需要避免加入含EDTA的试剂。但碧云天生产的His-tag Purification Resin (耐还原螯合型) (P2210，P2210FT，P2218，P2220，P2226)可与EDTA兼容，因而在抽提试剂中含有EDTA仍然可用于含有His标签的蛋白纯化。

本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。

为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。