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| 产品编号 | 产品名称 | 产品包装 | 产品价格 |
| P2271-0.5ml | Anti-Flag Affinity Gel (Anti-Flag亲和凝胶) | 0.5ml | 955.00元 |
| P2271-2ml | Anti-Flag Affinity Gel (Anti-Flag亲和凝胶) | 2ml | 2868.00元 |
| P2271-10ml | Anti-Flag Affinity Gel (Anti-Flag亲和凝胶) | 10ml | 11262.00元 |
碧云天生产的Anti-Flag Affinity Gel (Anti-Flag亲和凝胶)由高质量的鼠源Flag抗体与琼脂糖共价偶联而成，可与常规蛋白表达系统(如细菌、酵母或哺乳动物细胞)中含有Flag标签的蛋白结合，从而用于带有Flag标签的融合蛋白或蛋白复合物的纯化或免疫沉淀(Immunoprecipitation, IP)。
Flag标签(Flag-tag)、Myc标签(Myc-tag)、HA标签(HA-tag)、His标签(His-tag)和GST标签(GST-tag)等是商品化表达载体上的最常见的标签，通过此类标签的表达可方便的检测目的蛋白的表达及其功能或者用于融合蛋白的纯化。Flag-tag是8个氨基酸残基(DYKDDDDK)组成的多肽，常用的形式有Flag和3X Flag，通过基因工程技术把Flag-tag的核酸序列与目的基因的N端或C端连接。Flag-tag具有以下优点：Flag-tag通常不会与目的蛋白相互作用并且不会影响目的蛋白的功能、性质，这样就有利于对融合蛋白进行下游研究；Flag-tag作为标签蛋白，后续通过Flag抗体或Anti-Flag亲和凝胶即可对目的基因的表达、定位及功能进行检测或对目的蛋白进行纯化、免疫沉淀等；融合在N端的Flag，可被肠激酶(Enterokinase, EK)切除(DDDK)，从而得到特异的目的蛋白。基于以上优点，Flag标签已广泛的应用于蛋白表达、纯化、鉴定、功能研究及其蛋白相互作用等相关领域。
Anti-Flag Affinity Gel (Anti-Flag亲和凝胶)，也被称为Anti-DYKDDDDK Affinity Gel/Beads/Resin，可特异性地结合Flag融合蛋白，广泛应用于带有Flag标签的融合蛋白或蛋白复合物的纯化或免疫沉淀等实验。
本产品有较高的融合蛋白结合量、特异性强：每ml纯凝胶(settled gel)含有约8mg Flag抗体，可结合约1mg融合蛋白，且特异性强，非特异的杂蛋白结合少。
本产品可结合多种形式的Flag标签蛋白：本产品可特异性地结合甲硫氨酸修饰的N端Flag融合蛋白(Met-Flag-Protein)、N端Flag融合蛋白(Flag-Protein)、C端Flag融合蛋白(Protein-Flag)或中间带有Flag的融合蛋白。
本产品可选择多种洗脱方法：本产品根据蛋白结构的完整性、生物功能及后续应用的要求，可使用多种洗脱方法，包括Flag多肽、酸性、碱性、中性和SDS-PAGE上样缓冲液等洗脱液进行洗脱。特别是Flag多肽洗脱后不包含抗体的轻链和重链，可以有效解决免疫沉淀后Western实验中轻链和重链的干扰问题。
本产品可重复使用多次，性价比高：在正常情况下，本产品用于相同蛋白的纯化时可回收使用4-10次。如果用于免疫共沉淀检测蛋白蛋白的相互作用，不推荐重复使用。
本产品使用方便：本产品储存在TBS缓冲液中，不含甘油，使用时无须去除甘油，而且混匀和吸取都非常方便，吸取损失也较少。
本产品用于纯化E. coli中Flag融合蛋白的效果可以参考图1。
图1. 本产品用于纯化E. coli中Flag融合蛋白的效果图。A. M：marker；1：细菌裂解液(cell lysate)；2：上样流穿液(flow through)；3-7：碱性(pH12.0)洗脱法时各洗脱液。B. M：marker；1：细菌裂解液(cell lysate)；2：上样流穿液(flow through)；3-7：3X Flag竞争洗脱法时各洗脱液。注：实际的电泳结果会因样品、上样量等的不同而有所不同。
本产品的主要指标如下表：
| Characteristics | Description |
| Product content | 50% settled gel in TBS with preservative |
| Matrix | 4% cross‐linked agarose |
| Average bead size | 90μm |
| Antibody | Mouse monoclonal antibody against Flag-tag, clone G1 |
| Isotype | IgG2b |
| M.W. of antibody | Approximately 150kDa |
| Antibody concentration | Approximately 8mg Flag antibody per ml settled gel |
| Binding capacity | Approximately 1mg Flag‐tagged protein per ml settled gel |
| Gel reuse | The gel can be recycled for at least 4 times. If maintained properly, the gel can be reused 10 times with minimum loss of binding capability. |
| Elution method | Acid, alkaline, neutral, peptide competitive or SDS‐PAGE loading buffer elutions. Note: If elute with SDS-PAGE loading buffer, the light (~25kDa) and heavy (~50kDa) chain of G1 antibody will be denatured and release from the gel. |
| Reagents compatibility | Compatible with commonly used reagents at certain concentrations |
| Application | Protein purification、Pull down、IP、Co-IP |
本产品可兼容多种试剂：本产品可兼容一定浓度的DTT、EDTA、常见去垢剂、盐酸胍及尿酸等试剂。具体见下表。
| Reagent | Maximum tolerable concentration | Comments |
| EDTA | 5mM | Higher concentration of chelating agent will reduce purification efficiency with less target protein recovery. |
| β‐ME、DTT | 100mM for β‐ME; 80mM for DTT | Reducing agents will reduce disulfide bonds in the G1 antibody on the gel. Avoid reducing agents or keep at low concentration (<10mM) during purification process. When the reducing agents reach the maximum tolerable concentration mentioned here, there will be bands of antibody heavy chain (~50kDa) and light chain (~25kDa) in SDS‐PAGE analysis. The gel CANNOT BE REUSED if samples containing higher concentration of reducing reagents are applied to the gel. |
| Tween 20、Triton X‐100 | 5% for Tween 20 and Triton X‐100 | The concentration of Tween 20 and Triton X‐100 should not exceed 5%. |
| SDS | Not suggested | SDS will denature the G1 antibody on the gel. |
| NP‐40 | 4% | Higher concentration of NP‐40 will reduce purification efficiency with less target protein recovery. |
| GuHCl、Urea | 0.3M for GuHCl; 1.5M for Urea | Chaotropic reagents will denature the target Flag‐tagged protein. Do not exceed 0.3M GuHCl or 1.5M Urea. |
| Glycerol | 20% | Higher concentration of glycerol will interfere with the binding of Flag tagged protein. |
| NaCl | 0.5M | Higher concentration of NaCl will reduce purification efficiency with less target protein recovery. |
本产品为50%凝胶悬液，包装体积为总体积。
包装清单：
| 产品编号 | 产品名称 | 包装 |
| P2271-0.5ml | Anti-Flag Affinity Gel (Anti-Flag亲和凝胶) | 0.5ml |
| P2271-2ml | Anti-Flag Affinity Gel (Anti-Flag亲和凝胶) | 2ml |
| P2271-10ml | Anti-Flag Affinity Gel (Anti-Flag亲和凝胶) | 10ml |
| — | 说明书 | 1份 |
保存条件：
4℃保存，一年有效。
注意事项：
本产品不含甘油，请勿冷冻保存本产品。
本产品使用前一定要充分重悬，即充分颠倒若干次使混合均匀。
本产品含有微量的防腐剂，不会影响常规的蛋白或蛋白复合物的纯化和免疫沉淀。但如果后续涉及酶活性测定，使用本产品前宜先用TBS等适当溶液洗涤凝胶3次，以充分消除防腐剂可能产生的干扰。
在免疫沉淀或纯化时，建议设计阳性和阴性对照组。
蛋白样品收集后宜尽快完成纯化工作，并应始终放置在4℃或冰浴，以减缓蛋白降解。为有效抑制蛋白降解，可以在裂解液中添加适量的蛋白酶抑制剂混合物，例如碧云天的P1025/P1026蛋白酶抑制剂混合物(细菌抽提用)，或P1005/P1006蛋白酶抑制剂混合物(通用型)。
若离心不能完全除去蛋白样品中的不溶物，可以将样品溶液用0.45μm的滤膜过滤。
本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
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