碧云天的Rat IgA ELISA Kit (Rat IgA Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay Kit)，即大鼠总免疫球蛋白A酶联免疫吸附检测试剂盒，是一种用于特异性地高灵敏地定量检测大鼠血清、血浆或细胞培养上清液中的IgA的ELISA试剂盒。

本产品检测灵敏度高，特异性强，重复性好。多次重复检测结果表明，最小检出量为0.32ng/ml，本试剂盒采用特异性抗体识别大鼠IgA，与IgG、IgM没有交叉反应性，板内、板间变异系数均小于10%。

免疫球蛋白A (IgA)分为血清型和分泌型两种类型，在血清中是含量仅次于IgG的抗体，占总免疫球蛋白的15%-25%，在外分泌液，如初乳、唾液、眼泪、肠道分泌液和支气管分泌液中含量较高，起预防感染的重要作用。大部分血清型IgA为单体，大约10%-15%为双聚体，也有少量多聚体，其功能区分布与IgG相似，但稳定性和半衰期不如IgG。血清型IgA可以结合抗原，但不能激活补体的经典途径，因此不能像IgG那样发挥许多生物效应，主要以无炎症形式清除大量抗原，对维持机体内环境稳定有一定的作用。分泌型IgA为双聚体，性能稳定，在局部浓度大，是粘液分泌物中的主要免疫球蛋白，包括眼泪、唾液、汗液、初乳和泌尿生殖道、胃肠道、前列腺和呼吸道上皮的分泌物。它也少量存在于血液中。分泌型IgA的分泌成分保护免疫球蛋白不被蛋白水解酶降解。因此，分泌型IgA可以在恶劣的胃肠道环境中存活并提供保护，抑制在身体分泌物中繁殖的微生物。分泌型IgA还可以抑制其它免疫球蛋白的炎症作用。母乳中的分泌型IgA提供了婴儿出生后4-6个月内的局部免疫屏障。

本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法(Sandwich ELISA)检测 样品中大鼠IgA的浓度，其原理见图1。大鼠IgA特异的单克隆捕获抗体已预包被于酶标板上，当加入标准品或样品时，其中的大鼠IgA会与捕获抗体结合。当加入辣根过氧化物酶标记大鼠IgA抗体后，辣根过氧化物酶标记大鼠IgA抗体与大鼠IgA结合，形成夹心的免疫复合物。最后加入显色剂TMB溶液，固相捕获的辣根过氧化物酶就会催化无色的显色剂氧化成蓝色物质，在加入终止液后呈黄色。通过酶标仪检测450nm处的吸光度值就能实现定量检测。大鼠IgA浓度与A450值呈正比，通过绘制标准曲线，对照样品吸光度值，即可计算出样品中靶蛋白浓度。

图1. 双抗体夹心ELISA原理图。

一个包装的本试剂盒，包括标准品检测，可以进行96次检测。

标准品4℃保存，1-2周内有效，-20℃保存6个月内有效，试剂盒其它组分4℃保存6个月内有效。除标准品外，试剂盒其它组分严禁冻存。

由于标准品一般是冻干粉，在制备后需要严格校准，所以标准品的瓶数及每瓶标准品所需加入的稀释液体积请以实际收到的试剂盒及标准品标签上的标注为准。

洗涤液(20X)在低温下可能有结晶，如果发现有结晶，请室温水浴加热使结晶完全溶解后再配制工作液。

为保证标准品的精确性，标准品配制使用后，如果有剩余请勿再次使用。

TMB溶液请勿接触氧化剂和金属，否则容易失效。

加样时，请注意每个样品或标准品必须更换枪头，一方面避免交叉污染，另一方面也避免吸取体积的误差。

由于本试剂盒均经过独立测试，所以请勿混用不同货号和不同批次的试剂盒组分，即使是同种试剂盒不同批次的试剂盒组分也不能混用。多个试剂盒同时检测时，请独立使用各个试剂盒中的试剂，请勿使用不同试剂盒中相同名称的组分。

充分混匀对保证反应结果的精准性很重要，在加液后请轻轻晃动整个96孔板，以保证混匀。

本试剂盒很多操作在室温进行，要求严格控制室温在25-28℃。温度低于25℃会导致最终检测到的吸光度显著下降。

洗涤过程非常重要，洗涤不充分会使精确度下降并导致结果误差较大。

检测标准品和样品时建议设置重复孔，以确保检测结果的可信度。

加样过程中须避免气泡的产生。

本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。

为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。