碧云天的Mouse IL-9 ELISA Kit (Mouse Interleukin-9 Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay Kit)，即小鼠白细胞介素9酶联免疫吸附检测试剂盒，是一种用于特异性地高灵敏地定量检测小鼠血清、血浆或细胞培养上清液中的IL-9的ELISA试剂盒。

本产品检测灵敏度高，特异性强，重复性好。多次重复检测结果表明，最小检出量为46pg/ml，与人IL-9，IL-9 R等均没有交叉反应，与大鼠IL-9有0.3%的交叉反应，板内、板间变异系数均小于10%。

白细胞介素9 (Interleukin 9, IL-9)是一种分子量在28-30kDa之间的单体糖基化蛋白，属于IL-7/IL-9家族，是一种多效性细胞因子，主要由CD4⁺T细胞产生，肥大细胞和自然杀伤细胞也能产生IL-9。最初IL-9被认为是T细胞和肥大细胞的生长因子，之后研究发现IL-9还能调节B细胞免疫球蛋白的产生、增强肥大细胞蛋白酶的表达、促进杯状细胞增生和粘液产生，表明IL-9可能参与过敏性炎症反应的发生。IL-9包含144个氨基酸，其中包括18个氨基酸的信号肽，成熟的IL-9结构中还具有10个半胱氨酸残基和4个潜在的N连接糖基化位点。

IL-9通过与异质二聚体的受体复合物作用传递信号。IL-9受体由特异性的IL-9 Rα和γc链组成。IL-9 Rα在多种免疫细胞表面都有表达，激活后能够促进肥大细胞生长以及在发炎部位的聚集。IL-9 Rα在非造血细胞表面也有所表达，例如气道和小肠上皮细胞、平滑肌细胞和角质细胞等。

IL-9与受体结合后，会激活多种STATs，调节目标基因转录；还会影响Ras/Raf/MEK/ERK信号通路，发挥促有丝分裂作用；同时也能够作用于PI3K/AKT信号通路，发挥抗细胞凋亡的作用。

本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法(Sandwich ELISA)检测样品中小鼠 IL-9的浓度，其原理见图1。小鼠IL-9特异的单克隆捕获抗体已预包被于酶标板上，当加入标准品或样品时，其中的小鼠IL-9会与捕获抗体结合。当加入生物素化的抗小鼠IL-9抗体后，生物素化抗小鼠IL-9抗体与小鼠IL-9结合，形成夹心的免疫复合物。随后加入辣根过氧化物酶标记Streptavidin (HRP-Streptavidin)，由于生物素与链霉亲和素(Streptavidin)可以特异性地结合，因此链霉亲和素连接的HRP就会与夹心的免疫复合物连接起来而被固相捕获。最后加入显色剂TMB溶液，固相捕获的辣根过氧化物酶就会催化无色的显色剂氧化成蓝色物质，在加入终止液后呈黄色。通过酶标仪检测450nm处的吸光度值就能实现定量检测。小鼠IL-9浓度与A450值呈正比，通过绘制标准曲线，对照样品吸光度值，即可计算出样品中小鼠IL-9浓度。

图1. 双抗体夹心ELISA原理图。

一个包装的本试剂盒，包括标准品检测，可以进行96次检测。

标准品4℃保存，1-2周内有效，-20℃保存6个月内有效；试剂盒其它组分4℃保存6个月内有效。除标准品外，试剂盒其它组分严禁冻存。

由于标准品一般是冻干粉，在制备后需要严格校准，所以标准品的瓶数及每瓶标准品所需加入的稀释液体积请以实际收到的试剂盒及标准品标签上的标注为准。

洗涤液(20X)在低温下可能有结晶，如果发现有结晶，请室温水浴加热使结晶完全溶解后再配制工作液。

为保证标准品的精确性，标准品配制使用后，如果有剩余请勿再次使用。

TMB溶液请勿接触氧化剂和金属，否则容易失效。

加样时，请注意每个样品或标准品必须更换枪头，一方面避免交叉污染，另一方面也避免吸取体积的误差。

由于本试剂盒均经过独立测试，所以请勿混用不同货号和不同批次的试剂盒组分，即使是同种试剂盒不同批次的试剂盒组分也不能混用。多个试剂盒同时检测时，请独立使用各个试剂盒中的试剂，请勿使用不同试剂盒中相同名称的组分。

充分混匀对保证反应结果的精准性很重要，在加液后请轻轻晃动整个96孔板，以保证混匀。

本试剂盒很多操作在室温进行，要求严格控制室温在25-28℃。温度低于25℃会导致最终检测到的吸光度显著下降。

洗涤过程非常重要，洗涤不充分会使精确度下降并导致结果误差较大。

检测标准品和样品时建议设置重复孔，以确保检测结果的可信度。

加样过程中须避免气泡的产生。

本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。

为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。