碧云天的Mouse L-selectin/CD62L ELISA Kit (Mouse L-selectin/CD62L Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay Kit)，即小鼠L-选择素酶联免疫吸附检测试剂盒，是一种用于特异性地高灵敏地定量检测小鼠血清、血浆或细胞培养上清液中的L-selectin/CD62L的ELISA试剂盒。

本产品检测灵敏度高，特异性强，重复性好。多次重复检测结果表明，最小检出量为116pg/ml，与小鼠的E-selectin、ICAM-1、VCAM-1、p-selectin等均没有交叉反应，与人L-selectin没有交叉反应性。板内、板间变异系数均小于10%。

L-选择素(L-selectin)，也称为CD62L，是一种在白细胞和植入前胚胎上发现的细胞粘附分子。它属于蛋白质的选择素家族，可识别唾液酸化的碳水化合物基团。L-selectin是一种细胞表面成分，是粘附/归巢受体家族的成员，在淋巴细胞-内皮细胞相互作用中起重要作用。该分子由多个结构域组成：一个与凝集素同源结构域，一个与表皮生长因子同源结构域，两个与C3/C4结合蛋白中的共有重复单元同源结构域[1]。

L-selectin充当淋巴细胞通过高内皮微静脉进入次级淋巴组织的归巢受体。内皮细胞上的配体将与表达L-selectin的淋巴细胞结合，减缓淋巴细胞在血液中的运输，并促进淋巴细胞进入次级淋巴器官。该受体通常存在于T细胞的细胞表面。尚未遇到其特异性抗原的幼稚T淋巴细胞需要进入次级淋巴结以遇到其抗原。遇到抗原的中枢记忆T淋巴细胞表达L-selectin以定位于次级淋巴器官。在这里，它们准备好在再次遇到抗原时增殖。效应记忆T淋巴细胞不表达L-selectin，因为它们在外周循环并在遇到抗原后立即发挥效应功能[2]。L-selectin在人骨髓祖细胞上的高表达是细胞开始进行淋巴分化的早期迹象。

在植入子宫之前，L-selectin也存在于人类胚胎滋养层的表面。与其在淋巴细胞中的功能相似，L-selectin作为受体促进胚胎粘附到子宫内膜表面上皮的浸润部位。胚胎会分泌人绒毛膜促性腺激素(hCG)，它会下调位于侵袭部位子宫上皮上的抗粘连因子MUC-1。去除MUC-1会暴露子宫上皮的寡糖配体，从而允许滋养层细胞的L-selectin与受体结合，随后胚胎粘附和侵入[3]。

本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法(Sandwich ELISA)检测样品中小鼠L-selectin/CD62L的浓度，其原理见图1。小鼠L-selectin/CD62L特异的单克隆捕获抗体已预包被于酶标板上，当加入标准品或样品时，其中的小鼠L-selectin/CD62L会与捕获抗体结合。当加入生物素化的抗小鼠L-selectin/CD62L抗体后，生物素化抗小鼠L-selectin/CD62L抗体与小鼠L-selectin/CD62L结合，形成夹心的免疫复合物。随后加入辣根过氧化物酶标记Streptavidin (HRP-Streptavidin)，由于生物素与链霉亲和素(Streptavidin)可以特异性地结合，因此链霉亲和素连接的HRP就会与夹心的免疫复合物连接起来而被固相捕获。最后加入显色剂TMB溶液，固相捕获的辣根过氧化物酶就会催化无色的显色剂氧化成蓝色物质，在加入终止液后呈黄色。通过酶标仪检测450nm处的吸光度值就能实现定量检测。小鼠L-selectin/CD62L浓度与A450值呈正比，通过绘制标准曲线，对照样品吸光度值，即可计算出样品中靶蛋白浓度。

图1. 双抗体夹心ELISA原理图 。

一个包装的本试剂盒，包括标准品检测，可以进行96次检测。

标准品4℃保存，1-2周内有效，-20℃保存6个月内有效，试剂盒其它组分4℃保存6个月内有效。除标准品外，试剂盒其它组分严禁冻存。

由于标准品一般是冻干粉，在制备后需要严格校准，所以标准品的瓶数及每瓶标准品所需加入的稀释液体积请以实际收到的试剂盒及标准品标签上的标注为准。

洗涤液(20X)在低温下可能有结晶，如果发现有结晶，请室温水浴加热使结晶完全溶解后再配制工作液。

为保证标准品的精确性，标准品配制使用后，如果有剩余请勿再次使用。

TMB溶液请勿接触氧化剂和金属，否则容易失效。

加样时，请注意每个样品或标准品必须更换枪头，一方面避免交叉污染，另一方面也避免吸取体积的误差。

由于本试剂盒均经过独立测试，所以请勿混用不同货号和不同批次的试剂盒组分，即使是同种试剂盒不同批次的试剂盒组分也不能混用。多个试剂盒同时检测时，请独立使用各个试剂盒中的试剂，请勿使用不同试剂盒中相同名称的组分。

充分混匀对保证反应结果的精准性很重要，在加液后请轻轻晃动整个96孔板，以保证混匀。

本试剂盒很多操作在室温进行，要求严格控制室温在25-28℃。温度低于25℃会导致最终检测到的吸光度显著下降。

洗涤过程非常重要，洗涤不充分会使精确度下降并导致结果误差较大。

检测标准品和样品时建议设置重复孔，以确保检测结果的可信度。

加样过程中须避免气泡的产生。

本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。

为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。