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碧云天 BeyoRT II M-MLV反转录酶(RNase H-)(D7160L)

建库与高通量测序

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市场价¥1393
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  • 商品名称:碧云天 BeyoRT II M-MLV反转录酶(RNase H-)(D7160L)
  • 商品编号:D7160L
  • 品牌:碧云天
  • 上架时间:2019-09-03
  • 商品毛重:10克
  • 库存: 65535
  • 详细参数>>
产品编号 产品名称 产品包装 产品价格
D7160FT BeyoRT™ II M-MLV反转录酶(RNase H-) (试用装) 2000U .00元
D7160S BeyoRT™ II M-MLV反转录酶(RNase H-) 10KU 109.00元
D7160M BeyoRT™ II M-MLV反转录酶(RNase H-) 50KU 427.00元
D7160L BeyoRT™ II M-MLV反转录酶(RNase H-) 200KU 1393.00元

      碧云天生产的BeyoRT™ II M-MLV反转录酶(RNase H-),即BeyoRT™ II M-MLV reverse transcriptase (RNase H-),是一种经过改造和优化的M-MLV反转录酶,具有正常的依赖于RNA或DNA模板的DNA聚合酶活性,能够以RNA或DNA为模板,在引物存在的情况下进行互补DNA链的合成,即可以进行cDNA(complementary DNA)的第一链合成。
      本产品是最常用的反转录酶之一,广泛用于获得总RNA或mRNA后cDNA第一条链的合成,后续可以用于PCR、real-time PCR也称定量PCR(quantitative PCR, qPCR)、cDNA的第二链合成以及cDNA文库的构建等。BeyoRT™ II M-MLV反转录酶(RNase H-)还可以通过反转录用于DNA探针的荧光、生物素、地高辛或同位素标记等,也可以通过引物延伸(primer extention)来分析和研究RNA。
      M-MLV (Moloney Murine Leukemia Virus),也称MMLV或M-MuLV;反转录酶(reverse transcriptase)也称逆转录酶或RT酶。
      本产品无RNase H活性,反转录效率高、产物长度长。本产品与野生型M-MLV反转录酶相比,无RNase H活性,不能选择性剪切RNA和DNA杂合双链中的RNA,从而有助于高效合成长度更长的cDNA。本产品经测试可以轻松完成长度为8 kb及以下基因的反转录(参考图1),反转录的最大长度可以超过10 kb。

图1. 使用BeyoRT™ II M-MLV反转录酶(RNase H-)反转录总RNA后,对于不同长度的cDNA进行PCR扩增后的电泳效果图。图中可见对于0.2-8kb的cDNA可以非常高效地被反转录。

本产品热稳定性高。最适反应温度为42-45℃,但当温度达到50℃时仍具有很高活性,且可获得较高产量的cDNA (图2)。

图2. BeyoRT™ II M-MLV反转录酶(RNase H-)在不同温度下的反转录效果。用从NIH3T3细胞抽提获得的总RNA 500 ng,在20μl的反转录体系中按照图中所示温度进行反转录。反转录完成后取1μl反转录产品进行目的基因的PCR扩增和电泳。

本产品性价比高。BeyoRT™ II M-MLV反转录酶(RNase H-)是一种大肠杆菌重组高表达的的反转录酶,由于其表达量非常高,大大提高了本产品的性价比。本反转录酶含有从Moloney Murine Leukemia Virus reverse transcriptase基因克隆的缺失RNase H domain的pol基因,并进行了突变优化以提高其热稳定性、反转录效率和表达量。
酶活性定义:One unit of the enzyme incorporates 1 nmol of dTTP into acid-precipitable material in 10 min at 37℃ using poly(A)·oligo(dT) 12-18 as template-primer。反应体系为 50 mM Tris-HCl(pH 8.3), 75 mM KCl, 3 mM MgCl2, 10 mM DTT, 0.5mM [3H]-dTTP and 0.4 mM polyA·oligo(dT)12-18
纯度:不含DNA内切酶、外切酶和磷酸酯酶和RNA酶,可以满足常规反转录合成cDNA第一条链等的需要。
酶储存溶液:20 mM Tris-HCl (pH 7.5), 300 mM NaCl, 0.1 mM EDTA, 1 mM DTT, 0.01% NP-40 and 50% glycerol。
失活或抑制:80℃孵育10分钟可以导致M-MLV反转录酶(RNase H-)失活;EDTA、EGTA等螯合剂、无机磷酸盐或焦磷酸盐以及聚氨(polyamine)对M-MLV反转录酶(RNase H-)有抑制作用。
本产品中M-MLV反转录酶(RNase H-)的浓度为200U/μl,用于体积为20微升的反转录体系时,本试剂盒的不同包装足够分别进行50、250和1000次反转录反应。
包装清单:

产品编号 产品名称 包装
D7160L-1 BeyoRT™ II M-MLV反转录酶(RNase H-) 1ml
D7160L-2 Reaction Buffer (5X) 5ml
说明书 1份

保存条件:
-20℃保存。
注意事项: 
对于GC含量比较高的RNA的反转录,产品的使用说明中都给予了特别说明,请予以关注。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。 

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