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产品编号 | 产品名称 | 产品包装 | 产品价格 |
D7232 | PCR Kit with Taq | 400次 | 58.00元 |
D7233 | PCR Kit with Taq | 2000次 | 226.00元 |
本PCR试剂盒带有Taq DNA Polymerase、PCR buffer、dNTP和上样缓冲液,自备模板和引物即可进行PCR反应,适合用于普通的PCR或RT-PCR定性或定量检测,也可以用于不太长的的DNA片段的克隆。
Taq DNA Polymerase简称Taq酶或Taq,是最常用的DNA聚合酶之一。
Taq DNA Polymerase是一种来源于嗜热菌Thermus aquaticus的高度热稳定的DNA聚合酶,95℃孵育时的半衰期大于40分钟。Taq酶的分子量为94kDa。Taq酶可以催化5'至3'方向的依赖于DNA模板的脱氧核苷酸的聚合。Taq酶没有3'至5'的外切酶活性,有非常低的5'至3'外切酶活性。由于Taq酶没有3'至5'的外切酶活性,因此在DNA聚合过程中相当于核苷酸转移酶的作用,最终会导致PCR产物的3'末端会产生3'-dA overhangs,即产生带一个A的3'粘端。本Taq DNA Polymerase为recombinant Taq DNA Polymerase,通过大肠杆菌表达纯化获得,和纯化获得的天然Taq DNA Polymerase在各方面的性质相同。
活性定义:One unit of the enzyme catalyzes the incorporation of 10 nmol of deoxyribonucleotides into a
polynucleotide fraction(adsorbed on DE-81) in 30 min at 70℃. Enzyme activity is assayed in the following mixture: 67 mM Tris-HCl(pH 8.8 at 25℃), 6.7 mM MgCl2, 1 mM 2-mercaptoethanol, 50 mM NaCl, 0.1 mg/ml BSA, 0.75 mM activated calf thymus DNA, 0.2 mM of each dNTP, 0.4 MBq/ml [3H]dTTP。
纯度:不含DNA内切酶、外切酶和磷酸酯酶,不含RNA酶,满足常规PCR反应要求。
酶储存溶液:20 mM Tris-HCl(pH 8.0), 1 mM DTT, 0.1 mM EDTA, 100 mM KCl, 0.5% (v/v) Nonidet P40, 0.5% (v/v)
Tween 20 and 50% (v/v) glycerol。
10X PCR Buffer(with Mg2+):100 mM Tris-HCl(pH 8.8 at 25℃), 500 mM KCl, 15mM MgCl2, 0.8% (v/v) Nonidet
P40。
失活或抑制:酚氯仿抽提可以使Taq酶失活,加入脱氧胆酸钠至0.06%,SDS至0.01%,或sarkosyl至0.02%均可以抑制Taq酶。
试剂盒带有dNTP,该dNTP为dATP、dCTP、dGTP和dTTP的混合物,每种的浓度均为2.5mM。
本试剂盒用于50微升的PCR反应体系,足够用于160个反应,用于20微升的PCR反应体系,足够用于400个反应。
包装清单:
产品编号 | 产品名称 | 包装 |
D7232-1 | Taq DNA Polymerase(5U/μl) | 200U |
D7232-2 | 10X PCR Buffer(with Mg2+) | 1ml |
D7232-3 | dNTP(2.5mM each) | 0.7ml |
D7232-4 | 6X DNA Loading Buffer | 1ml |
- | 说明书 | 1份 |
保存条件:
-20℃保存。
注意事项:
由于PCR反应非常灵敏可以扩增目的基因序列超过1000万倍,在使用Taq酶时请注意避免微量待扩增DNA的污染,并尽量考虑设置不加模板的空白对照以确认是否有待扩增DNA的污染。
Taq DNA polymerase在PCR过程中每循环的出错几率约为2.2×10-5,对于大于1kb的DNA片段的克隆推荐使用出错几率更低的DNA聚合酶,例如Pfu DNA polymerase、BeyoTaq DNA polymerase等。对于普通的PCR或RT-PCR定性检测或定量检测,Taq DNA polymerase是最佳选择。
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