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碧云天 Easy-Load植物样品直接PCR预混液(2X)(D7289S)

PCR相关

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  • 商品名称:碧云天 Easy-Load植物样品直接PCR预混液(2X)(D7289S)
  • 商品编号:D7289S
  • 品牌:碧云天
  • 上架时间:2019-09-03
  • 商品毛重:10.100千克
  • 库存: 65535
  • 详细参数>>
产品编号 产品名称 产品包装 产品价格
D7289S Easy-Load™ Plant Direct PCR Master Mix (2X) 100次 185.00元
D7289M Easy-Load™ Plant Direct PCR Master Mix (2X) 500次 682.00元

碧云天生产的Easy-Load™ Plant Direct PCR Master Mix (2X),即Easy-Load™植物样品直接PCR预混液(2X),是一种使用特别便捷的专门用于植物样品的2倍浓度的PCR预混液,并且PCR结束后可以直接上样电泳无需添加上样缓冲液。本产品含有耐叶绿素的PlantTaq™ DNA聚合酶,这是一种经过基因工程改造的非常高效的适用于植物样品直接PCR检测的耐热DNA聚合酶。
对于植物叶片等样品可以直接PCR检测,无须提取DNA。本产品对玉米、丝瓜、甜椒、豆角、黄豆、辣椒、黄瓜、茄子、番茄等植物样品中的叶绿素、多糖、多酚等各种PCR抑制剂表现出超强的抗性,对于新鲜采集的、4℃保存或低温冻存的这些植物的叶片、嫩种子等,都无需进行DNA提取纯化,可以直接用于PCR扩增目的DNA。
所需样品少,耐受能力高。本产品用于20μl的PCR扩增体系时,通常仅加入0.1-1mm直径叶片即可顺利完成PCR检测。
本产品提供了一对阳性对照引物,便于确认PCR检测效果。该对引物是多种植物的通用引物,可以扩增多数植物叶绿体中高度保守的IRB18基因的297bp DNA片段。
本产品用于植物叶片检测的效果参考图1。图中可见,本产品对多种常见植物叶片都有很好的PCR扩增效果。
图1. 碧云天生产的Easy-Load™ Plant Direct PCR Master Mix (2X)扩增图中所示不同植物叶片中目的基因的检测效果图。使用Easy-Load™ Plant Direct PCR Master Mix (2X)及本产品提供的Control primer mix,在PCR体系中直接加入不同植物叶片,用于扩增IRB18基因的297bp DNA片段后的电泳效果图。M, DNA marker (D0110 DNA Ladder (0.2-12 kb, 12 bands));1, 豆角(Cowpea);2, 黄豆(Soybean);3, 丝瓜(Sponge gourd);4, 甜椒(Capsicum);5, 玉米(Maize);6, 黄瓜(Cucumber);7, 辣椒(Pepper);8, 茄子(Eggplant);9, 番茄(Tomato)。
本产品扩增不同长度目的基因的效果参考图2。图中可见,本产品以番茄叶片为模板可以直接PCR扩增出长达5kb的DNA片段。
图2. 碧云天生产的Easy-Load™ Plant Direct PCR Master Mix (2X)直接以番茄叶片为模板扩增不同长度的目的基因的效果图。M, DNA marker (D0110 DNA Ladder (0.2-12 kb, 12 bands)); 1, IRB18(297bp);2, actin(693bp);3, rbcL(1201bp);4, rpoC2(2069bp);5, rpoC2(3079bp);6, rpoC2(3942bp);7, rpoC2(5000bp)。
本产品扩增获得的PCR产物带有3'-dA overhangs的粘性末端,可直接用于和T载体连接进行TA克隆。
用途:植物叶片等比较柔嫩的组织样品基因组DNA中目的基因的直接扩增、基因分型(如基因缺失等),以及基因敲除或转基因植物基因型分析。
失活或抑制:酚氯仿抽提可以使Easy-Load™ Plant Direct PCR Master Mix (2X)中含有的PlantTaq™ DNA Polymerase失活。
本产品如果用于50微升的PCR反应体系,两种包装的本产品分别足够用于40个和200个反应;如果用于20微升的PCR反应体系,两种包装的本产品分别足够用于100个和500个反应。
包装清单:

产品编号 产品名称 包装
D7289S-1 Easy-Load™ Plant Direct PCR Master Mix (2X) 1ml
D7289S-2 Control primer mix (10μM each) 25μl
说明书 1份

保存条件:
-20℃保存。适当避免反复冻融。
注意事项:
由于PCR反应非常灵敏,在使用Easy-Load™ Plant Direct PCR Master Mix (2X)时请注意避免微量待扩增DNA的污染,并尽量考虑设置不加模板的空白对照以确认是否有待扩增DNA的污染。
设置PCR反应体系时,20μl和50μl PCR体系中植物样品的推荐用量分别为0.1-1mm和0.3-3mm直径叶片或类似大小其它比较柔嫩的植物组织,可以直接添加到PCR体系中,无需进行任何额外处理。经测试本产品适用于柔嫩新鲜种子的直接PCR,但不适用于干硬种子的直接PCR。
PCR反应结束之后,酌情3000-5000g离心3-5min以沉淀植物组织碎片,便于吸取上清用于电泳分析等。
需自备Nuclease-Free Water。推荐选购碧云天生产的ST876 BeyoPure™ Ultrapure Water (DNase/RNase-Free, Sterile)
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

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