碧云天的Mouse Adiponectin ELISA Kit (Mouse Adiponectin Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay Kit)，即小鼠脂联素酶联免疫吸附检测试剂盒，是一种用于特异性地高灵敏地定量检测小鼠血清、血浆或细胞培养上清液中的Adiponectin的ELISA试剂盒。
本产品检测灵敏度高，特异性强，重复性好。多次重复检测结果表明，最小检出量为36.5pg/ml，与人TNF-α、TWEAK等均没有交叉反应，与大鼠Adiponectin有交叉反应，板内、板间变异系数均小于10%。
脂联素(Adiponectin)，又称Acrp30 (Adipocyte Complement-Related Protein)，adipoQ、apM1 (Adipose Most 
Abundant Gene Transcript 1)或GBP28 (Gelatin-Binding Protein)，是一种分子量30kDa的糖蛋白，主要由脂肪细胞分泌，参与调控代谢和炎症过程。成熟的小鼠脂联素含有N端的胶原蛋白区域(66个氨基酸)和C端的C1q/TNF-α样球状区域(137个氨基酸)，与人和大鼠脂联素分别具有83%和91%的氨基酸同源性。
脂联素以90kDa的同源三聚体形式存在，其中两个亚基以二硫键连接，第三个亚基以非共价键连接。两个三聚体能够通过共价键相连形成180kDa的六聚体复合物，六聚体又能形成分子量超过300kDa的HMW (High Molecular Weight)脂联素。血浆中，不同脂联素变体之间稳定存在，不能发生互换。不同变体含量比例的高低具有明显的生物学意义，在女性体内，HMW脂联素的浓度远高于男性，三聚体和六聚体的脂联素浓度在男女之间也有差别。血浆中脂联素水平通常占总体血浆蛋白的0.01%左右。脂联素通过与7次跨膜受体Adipo R1和Adipo R2作用发挥生物学活性，Adipo R1表达广泛，与脂联素的剪切形式gAdiponectin具有更高的亲和力；Adipo R2则主要表达在肝脏上，与两种形式的脂联素亲和力基本相同。不同形式的脂联素同样还能与肌肉中的钙黏蛋白13和一些生长因子相互作用。
脂联素通过调控葡萄糖和脂肪酸代谢增强胰岛素敏感性，它能够减少血浆中葡萄糖和甘油三酯浓度，升高胰高血糖素，但并不改变胰岛素浓度。在肝脏中，脂联素能够增强胰岛素对糖异生的抑制作用。在骨骼肌中，脂联素能够促进脂肪酸吸收并氧化，促进葡萄糖吸收和乳酸盐产生。脂联素的不同变体能够特异性的激活肝脏和肌肉中的AMPK和NFκB通路。在成人体内，总脂联素水平与代谢综合征成负相关，HMW脂联素水平的减少与肥胖、胰岛素抵抗、脂肪酸氧化减少、血脂异常、冠状动脉疾病和动脉粥样硬化形成相关。在接受胰岛素增敏剂噻唑烷二酮类药物治疗时，血浆中HMW脂联素水平会出现升高。
脂联素与受体结合后可以通过激活LKB1、CaMKKβ或SIRT1参与调控AMPK的活化，活化的AMPK可以使胰岛素受体底物的酪氨酸残基磷酸化，磷酸化的胰岛素受体底物募集并激活PI3K/AKT通路。
本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法(Sandwich ELISA)检测样品中小鼠Adiponectin的浓度，其原理见图1。小鼠Adiponectin特异的单克隆捕获抗体已预包被于酶标板上，当加入标准品或样品时，其中的小鼠Adiponectin会与捕获抗体结合。当加入生物素化的抗小鼠Adiponectin抗体后，生物素化抗小鼠Adiponectin抗体与小鼠Adiponectin结合，形成夹心的免疫复合物。随后加入辣根过氧化物酶标记Streptavidin (HRP-Streptavidin)，由于生物素与链霉亲和素(Streptavidin)可以特异性地结合，因此链霉亲和素连接的HRP就会与夹心的免疫复合物连接起来而被固相捕获。最后加入显色剂TMB溶液，固相捕获的辣根过氧化物酶就会催化无色的显色剂氧化成蓝色物质，在加入终止液后呈黄色。通过酶标仪检测450nm处的吸光度值就能实现定量检测。小鼠Adiponectin浓度与A450值呈正比，通过绘制标准曲线，对照样品吸光度值，即可计算出样品中小鼠Adiponectin浓度。

图1. 双抗体夹心ELISA原理图。

一个包装的本试剂盒，包括标准品检测，可以进行96次检测。
包装清单：

保存条件：
标准品4℃保存，1-2周内有效，-20℃保存6个月内有效；试剂盒其它组分4℃保存6个月内有效。除标准品外，试剂盒其它组分严禁冻存。
注意事项：
由于标准品一般是冻干粉，在制备后需要严格校准，所以标准品的瓶数及每瓶标准品所需加入的稀释液体积请以实际收到的试剂盒及标准品标签上的标注为准。
洗涤液(20X)在低温下可能有结晶，如果发现有结晶，请室温水浴加热使结晶完全溶解后再配制工作液。
为保证标准品的精确性，标准品配制使用后，如果有剩余请勿再次使用。
TMB溶液请勿接触氧化剂和金属，否则容易失效。
加样时，请注意每个样品或标准品必须更换枪头，一方面避免交叉污染，另一方面也避免吸取体积的误差。
由于本试剂盒均经过独立测试，所以请勿混用不同货号和不同批次的试剂盒组分，即使是同种试剂盒不同批次的试剂盒组分也不能混用。多个试剂盒同时检测时，请独立使用各个试剂盒中的试剂，请勿使用不同试剂盒中相同名称的组分。
充分混匀对保证反应结果的精准性很重要，在加液后请轻轻晃动整个96孔板，以保证混匀。
本试剂盒很多操作在室温进行，要求严格控制室温在25-28℃。温度低于25℃会导致最终检测到的吸光度显著下降。
洗涤过程非常重要，洗涤不充分会使精确度下降并导致结果误差较大。
检测标准品和样品时建议设置重复孔，以确保检测结果的可信度。
加样过程中须避免气泡的产生。
本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。