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碧云天 Human Adiponectin ELISA Kit(人Adiponectin ELISA试剂盒)(PA008)

ELISA

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  • 商品名称:碧云天 Human Adiponectin ELISA Kit(人Adiponectin ELISA试剂盒)(PA008)
  • 商品编号:PA008
  • 品牌:碧云天
  • 上架时间:2019-09-06
  • 商品毛重:10.100千克
  • 库存: 10008
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产品编号 产品名称 产品包装 产品价格
PA008 Human Adiponectin ELISA Kit 96次 3198.00元

碧云天的Human Adiponectin ELISA Kit (Human Adiponectin Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay Kit),即人脂联素酶联免疫吸附检测试剂盒,是一种用于特异性地高灵敏地定量检测人血清、血浆或细胞培养上清液中的Adiponectin的ELISA试剂盒。
本产品检测灵敏度高,特异性强,重复性好。多次重复检测结果表明,最小检出量为56pg/ml,与人4-1BB、APRIL、Fas Ligand、GITR Ligand、LIGHT、OX40 Ligand、TNF-α等均没有交叉反应,板内、板间变异系数均小于10%。
脂联素(Adiponectin),又称Acrp30 (Adipocyte Complement-Related Protein),adipoQ、apM1 (Adipose Most 
Abundant Gene Transcript 1)或GBP28 (Gelatin-Binding Protein),是脂肪细胞特有的一种分泌蛋白,主要参与维持体内葡萄糖-脂质平衡。体内游离的脂联素水平较高,通常占总体血浆蛋白的0.01%。脂联素结构中N端含有胶原蛋白样结构域,C端具有球状结构域,其中包含一段与补体因子C1q极为相似的序列和结构。脂联素的C1q-like区域和TNF家族成员虽然在氨基酸序列上几乎没有相似性,但是他们之间却具有相似的三级结构和一些保守的氨基酸残基,这表明二者之间可能存在某种进化连接。脂联素会形成分子量不同的三聚体、六聚体和高阶低聚体复合物,复合物类型的不同将会影响到脂联素的生物活性。在脂肪细胞分化或受到胰岛素刺激时细胞会产生并分泌脂联素,脂联素受体分AdipoR1和AdipoR2两种,AdipoR1主要表达在骨骼肌上,而AdipoR2则主要表达在肝脏组织。
向非肥胖糖尿病小鼠中注射一定剂量的脂联素会导致胰岛素依赖性的葡萄糖水平减少,这可能是由于包括脂联素调节甘油三酯代谢在内的胰岛素敏感效应。除了正常的脂联素外,血液中还存在一种仅含有C端球状结构域的脂联素(gAdiponectin),这种脂联素能够促进体重减轻,调节小鼠肌肉和肝脏中游离脂肪酸的氧化,其调节效果明显优于正常脂联素。脂联素能够促进脂质氧化的机制可能与其能够调节CD36、乙酰辅酶A氧化酶、AMPK和PPARγ等甘油三酯代谢相关蛋白的表达及活性相关。
游离的脂联素浓度与肥胖之间存着负相关性,脂联素水平的升高都伴随着体重的减轻。脂联素的增加通常与胰岛素抵抗和血胰岛素过多相关,据报道II型糖尿病患者体内的脂联素水平会有所下降,噻唑烷二酮(Thiazolidinediones, TZD)作为胰岛素增敏剂,是目前常用的降糖药之一,它能够升高胰岛素抵抗患者体内的脂联素水平。脂联素水平增高会有效降低II型糖尿病的发病风险。核磁共振光谱结果显示人体肌肉组织细胞内的脂质含量与脂联素浓度呈负相关,这可能是因为脂联素能够诱导脂肪酸氧化所造成。脂联素还具有抗动脉粥样硬化和抗炎的效果。在冠状动脉性心脏病患者体内,血浆内脂联素的浓度会明显降低。体外,脂联素能够抑制内皮细胞粘附分子的表达,抑制单核细胞的附着。
脂联素与受体结合后可以通过激活LKB1、CaMKKβ或SIRT1参与调控AMPK的活化,活化的AMPK可以使胰岛素受体底物(Insulin Recptor Substrate1, IRS1)的酪氨酸残基磷酸化,磷酸化的IRS1募集并激活PI3K/AKT通路,导致脂肪酸氧化,增加葡萄糖摄取。
      本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法(Sandwich ELISA)检测样品中人Adiponectin的浓度,其原理见图1。人Adiponectin特异的单克隆捕获抗体已预包被于酶标板上,当加入标准品或样品时,其中的人Adiponectin会与捕获抗体结合。当加入生物素化的抗人Adiponectin抗体后,生物素化抗人Adiponectin抗体与人Adiponectin结合,形成夹心的免疫复合物。随后加入辣根过氧化物酶标记Streptavidin (HRP-Streptavidin),由于生物素与链霉亲和素(Streptavidin)可以特异性地结合,因此链霉亲和素连接的HRP就会与夹心的免疫复合物连接起来而被固相捕获。最后加入显色剂TMB溶液,固相捕获的辣根过氧化物酶就会催化无色的显色剂氧化成蓝色物质,在加入终止液后呈黄色。通过酶标仪检测450nm处的吸光度值就能实现定量检测。人Adiponectin浓度与A450值呈正比,通过绘制标准曲线,对照样品吸光度值,即可计算出样品中人Adiponectin浓度。

图1. 双抗体夹心ELISA原理图。

一个包装的本试剂盒,包括标准品检测,可以进行96次检测。
包装清单:

产品编号 产品名称 包装
PA008-1 人Adiponectin抗体预包被板 8孔×12条
PA008-2 标准品稀释液(5X) 20ml
PA008-3 人Adiponectin标准品 2-4瓶
PA008-4 人Adiponectin生物素化抗体 10ml
PA008-5 辣根过氧化物酶标记Streptavidin 10ml
PA008-6 洗涤液(20X) 30ml
PA008-7 TMB溶液 10ml
PA008-8 终止液 5ml
PA008-9 封板膜(透明) 2张
PA008-10 封板膜(白色) 2张
- 说明书 1份

保存条件:
标准品4℃保存,1-2周内有效,-20℃保存6个月内有效;试剂盒其它组分4℃保存6个月内有效。除标准品外,试剂盒其它组分严禁冻存。
注意事项:
由于标准品一般是冻干粉,在制备后需要严格校准,所以标准品的瓶数及每瓶标准品所需加入的稀释液体积请以实际收到的试剂盒及标准品标签上的标注为准。
洗涤液(20X)在低温下可能有结晶,如果发现有结晶,请室温水浴加热使结晶完全溶解后再配制工作液。
为保证标准品的精确性,标准品配制使用后,如果有剩余请勿再次使用。
TMB溶液请勿接触氧化剂和金属,否则容易失效。
加样时,请注意每个样品或标准品必须更换枪头,一方面避免交叉污染,另一方面也避免吸取体积的误差。
由于本试剂盒均经过独立测试,所以请勿混用不同货号和不同批次的试剂盒组分,即使是同种试剂盒不同批次的试剂盒组分也不能混用。多个试剂盒同时检测时,请独立使用各个试剂盒中的试剂,请勿使用不同试剂盒中相同名称的组分。
充分混匀对保证反应结果的精准性很重要,在加液后请轻轻晃动整个96孔板,以保证混匀。
本试剂盒很多操作在室温进行,要求严格控制室温在25-28℃。温度低于25℃会导致最终检测到的吸光度显著下降。
洗涤过程非常重要,洗涤不充分会使精确度下降并导致结果误差较大。
检测标准品和样品时建议设置重复孔,以确保检测结果的可信度。
加样过程中须避免气泡的产生。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。


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