碧云天的Estradiol ELISA Kit (Estradiol Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay Kit)，即雌二醇酶联免疫吸附检测试剂盒，是一种用于特异性地高灵敏地定量检测所有哺乳动物血清、血浆或细胞培养上清液中的雌二醇的ELISA试剂盒。
本产品检测灵敏度高，特异性强，重复性好。多次重复检测结果表明，最小检出量为12pg/ml，与雌激素酮、雌激素三醇、17-α-雌三醇分别有2.1%、1.5%和0.3%的交叉反应性，与氢化可的松、可的松、妊娠素等其他类似固醇类小分子交叉反应性均＜0.1%。
雌二醇(Estradiol)，又称17-β-estradiol、estrogen或E2，是女性体内最主要的雌性激素之一。主要在卵巢和胎盘中合成，但其他组织如乳房、大脑和动脉壁管也能合成雌二醇。绝经期前女性体内雌二醇水平远高于男性和绝经期后女性体内雌二醇水平，在怀孕期间会明显增加。组织中雌二醇浓度会远远高于游离的雌二醇浓度。其它雌性激素还有雌激素酮(Estrone,E1)和雌三醇(Estriol, E3)，另外还有植物中的植物雌激素和外源性雌激素。雌激素主要与性激素结合球蛋白(Sex Hormone Binding Globulin, SHBG)结合，从而限制了雌激素活性。作为疏水性分子，雌二醇独立存在时能够穿过细胞膜自由扩散。
在体内广泛表达了3种雌二醇受体(Estrogen Receptor)。ERα和ERβ属于细胞核受体，当与雌二醇结合后能够增强部分基因的转录。ERβ在不同的细胞中可能会介导不同的生物学效应。在细胞膜上也被证实存在ERα和ERβ受体，参与非遗传性调控。雌二醇的另一个受体属于G蛋白偶联受体，又叫做GPR30，参与激活腺苷酸环化酶信号通路和EGF受体。
在女性生育周期中，排卵前雌二醇主要由成熟卵泡产生，排卵后则由黄体产生。在人工排卵时，血浆中雌二醇浓度升高与成熟卵泡数增多有关。雌二醇能刺激子宫内膜增殖，从而为受精卵着床做好准备。雌二醇同时还会影响垂体促性腺激素、瘦素和胎盘激素产生。女性怀孕期间，受到胎盘素的影响体内雌二醇的浓度也会增加。雌二醇还能减少绝经期前的女性患心血管疾病的可能性，雌二醇能够增强机体免疫功能，但也会增加女性患自身免疫性疾病的概率。雌二醇能够调节一氧化氮的合成，减弱巨噬细胞活化，减少炎性细胞因子的生成，增强抗炎因子的产生。雌二醇能够促进皮下脂肪堆积，但能抑制内脏脂肪累积。雌二醇浓度过高，会增加绝经期后女性患乳腺癌的风险，但却能维持绝经期前女性的骨密度。
本试剂盒采用竞争法ELISA (Competitive ELISA)检测样品中雌二醇的浓度，其原理见图1。高特异性识别17-β-雌二醇的抗体已预包被于酶标板上，同时加入样品和辣根过氧化物酶标记17-β-雌二醇，样品中的17-β-雌二醇与辣根过氧化物酶标记17-β-雌二醇竞争性结合酶标板中包被的抗体，随后洗去游离的17-β-雌二醇与游离的辣根过氧化物酶标记17-β-雌二醇。最后加入显色剂TMB溶液，固相捕获的辣根过氧化物酶就会催化无色的TMB氧化成蓝色物质，在加入终止液后呈黄色。如果样本中17-β-雌二醇含量越多，则与抗体结合的辣根过氧化物酶标记17-β-雌二醇就越少，颜色越浅，即颜色与样品中17-β-雌二醇浓度成反比。通过酶标仪检测450nm处的吸光度值就能实现定量检测。17-β-雌二醇浓度与A450值呈反比，通过绘制标准曲线，对照样品吸光度值，即可计算出样品中17-β-雌二醇浓度。

图1. 竞争法ELISA原理图。

一个包装的本试剂盒，包括标准品检测，可以进行96次检测。
包装清单：

产品编号	产品名称	包装
PE223-1	Estradiol抗体预包被板	8孔×12条
PE223-2	Estradiol标准品	2瓶
PE223-3	样品稀释液	16ml
PE223-4	辣根过氧化物酶标记Estradiol	2-4瓶
PE223-5	洗涤液(20X)	30ml
PE223-6	TMB溶液	10ml
PE223-7	终止液	5ml
PE223-8	封板膜(透明)	2张
PE223-9	封板膜(白色)	2张
-	说明书	1份

保存条件：
辣根过氧化物酶标记Estradiol 4ºC保存，1-2周内有效，-20ºC保存6个月内有效；试剂盒其它组分4ºC保存6个月内有效。除辣根过氧化物酶标记Estradiol外，试剂盒其它组分严禁冻存。
注意事项：
由于辣根过氧化物酶标记Estradiol一般是冻干粉，在制备后需要严格校准，所以具体瓶数请以实际收到的试剂盒为准。
洗涤液(20X)在低温下可能有结晶，如果发现有结晶，请室温水浴加热使结晶完全溶解后再配制工作液。
为保证标准品的精确性，辣根过氧化物酶标记Estradiol配制使用后，如果有剩余请勿再次使用。
TMB溶液请勿接触氧化剂和金属，否则容易失效。
加样时，请注意每个样品或标准品必须更换枪头，一方面避免交叉污染，另一方面也避免吸取体积的误差。
由于本试剂盒均经过独立测试，所以请勿混用不同货号和不同批次的试剂盒组分，即使是同种试剂盒不同批次的试剂盒组分也不能混用。多个试剂盒同时检测时，请独立使用各个试剂盒中的试剂，请勿使用不同试剂盒中相同名称的组分。
充分混匀对保证反应结果的精准性很重要，在加液后请轻轻晃动整个96孔板，以保证混匀。
本试剂盒很多操作在室温进行，要求严格控制室温在25-28℃。温度低于25℃会导致最终检测到的吸光度显著下降。
洗涤过程非常重要，洗涤不充分会使精确度下降并导致结果误差较大。
检测标准品和样品时建议设置重复孔，以确保检测结果的可信度。
加样过程中须避免气泡的产生。
本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。