碧云天的Human GM-CSF ELISA Kit (Human Granulocyte-Macrophage Colony-Stimulating Factor Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay Kit)，即人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子酶联免疫吸附检测试剂盒，是一种用于特异性地高灵敏地定量检测人血清、血浆或细胞培养上清液中的GM-CSF的ELISA试剂盒。
本产品检测灵敏度高，特异性强，重复性好。多次重复检测结果表明，最小检出量为12.5pg/ml，与人EGF、Epo、FGF acidic、FGF basic、G-CSF、HGF、IFN-γ、IGF-I、IGF-II、IL-1、IL-2、IL-4、IL-6、IL-8、IL-10、IL-12、IL-13、KGF、LIF、M-CSF、MCP-1、SCF、TGF-α、TGF-β1、VEGF等均没有交叉反应，板内、板间变异系数均小于10%。
粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(Granulocyte-Macrophage Colony-Stimulating Factor, GM-CSF)，又称CSF-2，是一种分子量30kDa的多效性细胞因子，属于βc细胞因子家族，该家族还包括IL-3和IL-5。GM-CSF具有一个α螺旋结构，含有两个链内二硫键。多种活化的免疫细胞、间叶细胞和表皮细胞都能分泌产生GM-CSF。成熟的人GM-SCF与小鼠GM-CSF和大鼠GM-CSF分别具有54%和63%的氨基酸同源性。
GM-CSF的高亲和性受体由两部分组成，分子量50kDa的配体结合亚基GM-CSF Rα和120kDa的信号传导亚基βc。发挥功能时，GM-CSF、GM-CSF Rα及βc将以2:2:2的比例形成复合物。βc亚基同时还是IL-3和IL-5受体复合物的组成部分，因此IL-5也能通过GM-CSF Rα和βc进行信号传导。GM-CSF和受体结合后主要影响JAK/STAT、SRC家族激酶、PI3K/AKT和Ras/ERK1/2通路。
GM-CSF具有多种生物学功能，其能诱导单核细胞、中性粒细胞和嗜酸性粒细胞产生，与IL-4或Flt-3协同作用时还能诱导骨髓树突状细胞和真皮树突状细胞发展。GM-CSF同时还是中性粒细胞和树突状细胞的化学诱导物。GM-CSF还能促进Th1和Th17细胞介导的自身免疫炎症反应，与G-CSF共同作用还能促进肿瘤细胞的增殖和侵袭。
本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法(Sandwich ELISA)检测样品中人GM-CSF的浓度，其原理见图1。人GM-CSF特异的单克隆捕获抗体已预包被于酶标板上，当加入标准品或样品时，其中的人GM-CSF会与捕获抗体结合。当加入生物素化的抗人GM-CSF抗体后，生物素化抗人GM-CSF抗体与人GM-CSF结合，形成夹心的免疫复合物。随后加入辣根过氧化物酶标记Streptavidin (HRP-Streptavidin)，由于生物素与链霉亲和素(Streptavidin)可以特异性地结合，因此链霉亲和素连接的HRP就会与夹心的免疫复合物连接起来而被固相捕获。最后加入显色剂TMB溶液，固相捕获的辣根过氧化物酶就会催化无色的显色剂氧化成蓝色物质，在加入终止液后呈黄色。通过酶标仪检测450nm处的吸光度值就能实现定量检测。人GM-CSF浓度与A450值呈正比，通过绘制标准曲线，对照样品吸光度值，即可计算出样品中人GM-CSF浓度。

图1. 双抗体夹心ELISA原理图。

一个包装的本试剂盒，包括标准品检测，可以进行96次检测。
包装清单：

产品编号	产品名称	包装
PG355-1	人GM-CSF抗体预包被板	8孔×12条
PG355-2	样品分析缓冲液	5ml
PG355-3	标准品稀释液	10ml
PG355-4	人GM-CSF标准品	2-4瓶
PG355-5	人GM-CSF生物素化抗体	10ml
PG355-6	辣根过氧化物酶标记Streptavidin	10ml
PG355-7	洗涤液(20X)	30ml
PG355-8	TMB溶液	10ml
PG355-9	终止液	5ml
PG355-10	封板膜(透明)	2张
PG355-11	封板膜(白色)	2张
-	说明书	1份

保存条件：
标准品4℃保存，1-2周内有效，-20℃保存6个月内有效；试剂盒其它组分4℃保存6个月内有效。除标准品外，试剂盒其它组分严禁冻存。
注意事项：
由于标准品一般是冻干粉，在制备后需要严格校准，所以标准品的瓶数及每瓶标准品所需加入的稀释液体积请以实际收到的试剂盒及标准品标签上的标注为准。
洗涤液(20X)在低温下可能有结晶，如果发现有结晶，请室温水浴加热使结晶完全溶解后再配制工作液。
为保证标准品的精确性，标准品配制使用后，如果有剩余请勿再次使用。
TMB溶液请勿接触氧化剂和金属，否则容易失效。
加样时，请注意每个样品或标准品必须更换枪头，一方面避免交叉污染，另一方面也避免吸取体积的误差。
由于本试剂盒均经过独立测试，所以请勿混用不同货号和不同批次的试剂盒组分，即使是同种试剂盒不同批次的试剂盒组分也不能混用。多个试剂盒同时检测时，请独立使用各个试剂盒中的试剂，请勿使用不同试剂盒中相同名称的组分。
充分混匀对保证反应结果的精准性很重要，在加液后请轻轻晃动整个96孔板，以保证混匀。
本试剂盒很多操作在室温进行，要求严格控制室温在25-28℃。温度低于25℃会导致最终检测到的吸光度显著下降。
洗涤过程非常重要，洗涤不充分会使精确度下降并导致结果误差较大。
检测标准品和样品时建议设置重复孔，以确保检测结果的可信度。
加样过程中须避免气泡的产生。
本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。