碧云天的Human Hepcidin ELISA Kit (Human Hepcidin Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay Kit)，即人铁调素酶联免疫吸附检测试剂盒，是一种用于特异性地高灵敏地定量检测人血清、血浆或细胞培养上清液中的Hepcidin的ELISA试剂盒。
本产品检测灵敏度高，特异性强，重复性好。多次重复检测结果表明，最小检出量为200pg/ml，与人α2-Macroglobulin，小鼠的hepcidin等均没有交叉反应，本试剂盒检测总Hepcidin的含量，即能检测Hepcidin-20、Hepcidin-22、Hepcidin-24和Hepcidin-25。板内、板间变异系数均小于10%。
铁调素(Hepcidin)，又称肝脏表达抗菌蛋白(Liver Expressed Antimicrobial Protein 1,LEAP-1)，是一种多肽类激素，参与调节铁离子的代谢。Hepcidin以前激素原的形式合成，经过细胞内的酶切作用，最终以包含25个氨基酸的成熟多肽形式分泌。Hepcidin结构中含有8个半胱氨酸残基，彼此间能够形成4个二硫键，这样的结构对于维持Hepcidin在体液中的稳定性十分重要。Hepcidin的表达、加工和分泌主要都在肝细胞进行，Hepcidin的表达受到IL-6/JAK2/STAT3信号、内质网应激压力和BMP-6的影响。相反，MMP-15/MT2-MMP以及贫血、缺氧等则会抑制Hepcidin的表达。
Hepcidin最初是作为一种抗菌肽在人血液和尿液中被检测到，随后发现其还有调节铁离子代谢的能力。Hepcidin能够与细胞内铁转运蛋白结合，结合后会导致泛素介导的Hepcidin铁转运蛋白降解。铁转运蛋白的降解会导致巨噬细胞、肝细胞和肠细胞铁离子释放的减少，表明Hepcidin对炎症性血铁过少症具有一定调节作用。Hepcidin表达过多或过少对机体都具有一定影响。Hepcidin的过表达会导致体内铁离子水平过低，造成贫血；过高的Hepcidin浓度与非霍奇金性淋巴瘤患者的不良预后也有一定关联。然而，Hepcidin缺乏又会导致体内铁离子浓度增加，是导致遗传性血色沉着病中铁离子超负荷的主要原因。
本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法(Sandwich ELISA)检测样品中人Hepcidin的浓度，其原理见图1。人Hepcidin特异的单克隆捕获抗体已预包被于酶标板上，当加入标准品或样品时，其中的人Hepcidin会与捕获抗体结合。当加入生物素化的抗人Hepcidin抗体后，生物素化抗人Hepcidin抗体与人Hepcidin结合，形成夹心的免疫复合物。随后加入辣根过氧化物酶标记Streptavidin (HRP-Streptavidin)，由于生物素与链霉亲和素(Streptavidin)可以特异性地结合，因此链霉亲和素连接的HRP就会与夹心的免疫复合物连接起来而被固相捕获。最后加入显色剂TMB溶液，固相捕获的辣根过氧化物酶就会催化无色的显色剂氧化成蓝色物质，在加入终止液后呈黄色。通过酶标仪检测450nm处的吸光度值就能实现定量检测。人Hepcidin浓度与A450值呈正比，通过绘制标准曲线，对照样品吸光度值，即可计算出样品中人Hepcidin浓度。

图1. 双抗体夹心ELISA原理图。

一个包装的本试剂盒，包括标准品检测，可以进行96次检测。
包装清单：

产品编号	产品名称	包装
PH378-1	人Hepcidin抗体预包被板	8孔×12条
PH378-2	标准品稀释液(5X)	20ml
PH378-3	人Hepcidin标准品	2-4瓶
PH378-4	人Hepcidin生物素化抗体	10ml
PH378-5	辣根过氧化物酶标记Streptavidin	10ml
PH378-6	洗涤液(20X)	30ml
PH378-7	TMB溶液	10ml
PH378-8	终止液	5ml
PH378-9	封板膜(透明)	2张
PH378-10	封板膜(白色)	2张
-	说明书	1份

保存条件：
标准品4℃保存，1-2周内有效，-20℃保存6个月内有效；试剂盒其它组分4℃保存6个月内有效。除标准品外，试剂盒其它组分严禁冻存。
注意事项：
由于标准品一般是冻干粉，在制备后需要严格校准，所以标准品的瓶数及每瓶标准品所需加入的稀释液体积请以实际收到的试剂盒及标准品标签上的标注为准。
洗涤液(20X)在低温下可能有结晶，如果发现有结晶，请室温水浴加热使结晶完全溶解后再配制工作液。
为保证标准品的精确性，标准品配制使用后，如果有剩余请勿再次使用。
TMB溶液请勿接触氧化剂和金属，否则容易失效。
加样时，请注意每个样品或标准品必须更换枪头，一方面避免交叉污染，另一方面也避免吸取体积的误差。
由于本试剂盒均经过独立测试，所以请勿混用不同货号和不同批次的试剂盒组分，即使是同种试剂盒不同批次的试剂盒组分也不能混用。多个试剂盒同时检测时，请独立使用各个试剂盒中的试剂，请勿使用不同试剂盒中相同名称的组分。
充分混匀对保证反应结果的精准性很重要，在加液后请轻轻晃动整个96孔板，以保证混匀。
本试剂盒很多操作在室温进行，要求严格控制室温在25-28℃。温度低于25℃会导致最终检测到的吸光度显著下降。
洗涤过程非常重要，洗涤不充分会使精确度下降并导致结果误差较大。
检测标准品和样品时建议设置重复孔，以确保检测结果的可信度。
加样过程中须避免气泡的产生。
本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。