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产品编号 | 产品名称 | 产品包装 | 产品价格 |
PI493 | Mouse ICAM-1/CD54 ELISA Kit | 96次 | 3198.00元 |
碧云天的Mouse ICAM-1/CD54 ELISA Kit (Mouse Intercellular Adhesion Molecule 1/CD54 Enzyme-Linked
ImmunoSorbent Assay Kit),即小鼠细胞间粘附分子1酶联免疫吸附检测试剂盒,是一种用于特异性地高灵敏地定量检测小鼠血清、血浆或细胞培养上清液中的ICAM-1/CD54的ELISA试剂盒。
本产品检测灵敏度高,特异性强,重复性好。多次重复检测结果表明,最小检出量为82pg/ml,与小鼠sCD31、ICAM-2、sE-Selectin、sL-Selectin、sVCAM-1,人ICAM-1,大鼠的ICAM-1等均没有交叉反应,板内、板间变异系数均小于10%。
小鼠细胞间粘附分子(Intercellular Adhesion Molecule 1, ICAM-1),又称CD54,是一种分子量在80-110kDa之间的I型跨膜糖蛋白,在多种细胞上都有表达。ICAM-1分子共有537个氨基酸,其中包括27个氨基酸信号肽,458个氨基酸的胞外域、24个氨基酸的跨膜域和28个氨基酸的胞质域。在胞外域具有5个免疫球蛋白样区域和11个潜在的N连接糖基化位点。N端的第一个免疫球蛋白区域(D1)能够与淋巴细胞功能相关抗原1 (Lymphocyte Function Associated Antigen 1, LFA-1)结合,而第三个免疫球蛋白区域则能与Mac-1结合。膜结合的ICAM-1通常以二聚体形式存在,但单体的ICAM-1同样也能够与IFA-1结合。通过MMP-9及弹性蛋白酶介导的蛋白水解作用能够得到游离的ICAM-1。游离的ICAM-1二聚体与LFA-1具有更高的亲和力。成熟的小鼠ICAM-1与大鼠ICAM-1、人ICAM-1、犬ICAM-1和猪ICAM-1分别具有77%、53%、56%和52%的氨基酸同源性。
表达ICAM-1的细胞主要有平滑肌细胞、角质细胞、内皮细胞、成纤维细胞、气道上皮细胞、记忆T细胞、B细胞、浆细胞、单核细胞、红系祖细胞、活化的嗜酸性粒细胞及中性粒细胞、施万细胞、黑色素细胞和树突状细胞等。目前ICAM-1已知存在4种配体(或辅助受体),其中两种分别是整合素LFA-1/αLβ2 (CD11a/CD18)和Mac-1/αMβ2 (CD11b/CD18)。整合素β2主要表达在白细胞上,淋巴细胞主要表达LFA-1,而在自然杀伤细胞、中性粒细胞和单核细胞二者都有所表达。剩余两种配体则分别为载唾液酸蛋白和纤维蛋白原。
ICAM-1作为一种跨膜分子主要参与细胞迁移、抗原呈递和白细胞激活。当与LFA-1结合后,ICAM-1能够产生三种效应:炎症发生时,表达ICAM-1的内皮细胞能够调节IFA-1+的白细胞迁移并粘附在相应内皮细胞上,另外,表达ICAM-1的抗原提呈细胞和T细胞还能创造一个粘附界面,从而延长抗原呈现时间;ICAM-1配体能够对表达ICAM-1的细胞产生单一的诱导效应,例如表达ICAM-1的内皮细胞会将信号传递至细胞内,从而导致细胞骨架重构和内皮细胞收缩。当作用于T细胞时,ICAM-1激活会诱导幼稚T细胞增殖以及Th1细胞因子分泌;ICAM-1还能作为一个“被动配体”,促进LFA-1的调节活性。
本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法(Sandwich ELISA)检测样品中小鼠ICAM-1/CD54的浓度,其原理见图1。小鼠ICAM-1/CD54特异的单克隆捕获抗体已预包被于酶标板上,当加入标准品或样品时,其中的小鼠ICAM-1/CD54会与捕获抗体结合。当加入生物素化的抗小鼠ICAM-1/CD54抗体后,生物素化抗小鼠ICAM-1/CD54抗体与小鼠ICAM-1/CD54结合,形成夹心的免疫复合物。随后加入辣根过氧化物酶标记Streptavidin (HRP-Streptavidin),由于生物素与链霉亲和素(Streptavidin)可以特异性地结合,因此链霉亲和素连接的HRP就会与夹心的免疫复合物连接起来而被固相捕获。最后加入显色剂TMB溶液,固相捕获的辣根过氧化物酶就会催化无色的显色剂氧化成蓝色物质,在加入终止液后呈黄色。通过酶标仪检测450nm处的吸光度值就能实现定量检测。小鼠ICAM-1/CD54浓度与A450值呈正比,通过绘制标准曲线,对照样品吸光度值,即可计算出样品中小鼠ICAM-1/CD54浓度。
图1. 双抗体夹心ELISA原理图。
一个包装的本试剂盒,包括标准品检测,可以进行96次检测。
包装清单:
产品编号 | 产品名称 | 包装 |
PI493-1 | 小鼠ICAM-1/CD54抗体预包被板 | 8孔×12条 |
PI493-2 | 样品分析缓冲液 | 5ml |
PI493-3 | 标准品稀释液(5X) | 20ml |
PI493-4 | 小鼠ICAM-1/CD54标准品 | 2-4瓶 |
PI493-5 | 小鼠ICAM-1/CD54生物素化抗体 | 10ml |
PI493-6 | 辣根过氧化物酶标记Streptavidin | 10ml |
PI493-7 | 洗涤液(20X) | 30ml |
PI493-8 | TMB溶液 | 10ml |
PI493-9 | 终止液 | 5ml |
PI493-10 | 封板膜(透明) | 2张 |
PI493-11 | 封板膜(白色) | 2张 |
- | 说明书 | 1份 |
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