碧云天的Mouse IL-23 ELISA Kit (Mouse Interleukin-23 Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay Kit)，即小鼠白细胞介素23酶联免疫吸附检测试剂盒，是一种用于特异性地高灵敏地定量检测小鼠血清、血浆或细胞培养上清液中的IL-23的ELISA试剂盒。
本产品检测灵敏度高，特异性强，重复性好。多次重复检测结果表明，最小检出量为21.5pg/ml，与小鼠IL-12、IL-12 p35、IL-12 p40 dimer、IL-12 p40 monomer，人的IL-23、IL-12、IL-12 p35等均没有交叉反应，板内、板间变异系数均小于10%。
白细胞介素23 (Interleukin 23, IL-23)是一种与IL-12相关的细胞因子，以异质二聚体形式存在。IL-23由两个二硫键相连的亚基组成，一个是p19亚基，分子量为19kDa，属于IL-23特有亚基；另一个是p40亚基，又称IL-12β亚基，分子量为40kDa，同时也是IL-12的组成部分。小鼠p19亚基cDNA编码得到196个氨基酸的前体蛋白，其中包含21个氨基酸的信号肽和175个氨基酸的成熟区域，结构上与IL-6家族的单链细胞因子和IL-12中的p35亚基具有一定相似性。小鼠p40亚基cDNA编码得到335个氨基酸的前体蛋白，其中包括22个氨基酸的信号肽和313个氨基酸的成熟区域。在成熟区域中具有4个潜在的糖基化位点和一个C2型免疫球蛋白区域，以及一个III型纤连蛋白区域。成熟的小鼠p19亚基和p40亚基分别与大鼠p19亚基和p40亚基具有88%和92%的序列相似性。IL-23主要由活化的巨噬细胞、小神经角质细胞和单核细胞来源的树突状细胞产生。p19亚基在极化的T细胞中也有表达。
IL-23受体复合物由两个受体亚基组成：IL-12受体β1亚基(IL-12 Rβ1)和IL-23特异性受体亚基(IL-23 R)。IL-12 Rβ1是一种含有738个氨基酸的I型跨膜糖蛋白，其中包括546个氨基酸的胞外域和5个III型纤连蛋白区域；IL-23 R也属于I型跨膜糖蛋白，共有644个氨基酸残基，其中包括351个氨基酸的胞外域，具有2个III型纤连蛋白区域。IL-23受体复合物主要表达在小鼠Th1和Th2细胞、骨髓来源树突状细胞、IFN-γ活化巨噬细胞和(CD4⁺CD45RBlow)记忆T细胞上。IL-23能够与IL-12 Rβ1结合，但信号传递必须要有IL-23 R亚基的参与。IL-23所涉及到的信号通路与IL-2相似，信号传递过程中都需要Jak2、Tyk2、STATs参与。
IL-23免疫信号的激活能够最早诱导中性粒细胞到达感染部位，而更多的经典宿主防御和细胞因子应答则受IL-12刺激调控。IL-12能够诱导Th1细胞发展，诱导自然杀伤细胞产生IFN-γ，相反IL-23则会促进Th17细胞的发展和维持，该细胞主要产生IL-17A、IL-17F、IL-6和TNF-α。IL-23/IL-17是炎症反应中的重要调节因子。在小鼠模型中，过表达的IL-23会诱导致命的全身性炎症反应。IL-23作用于Th17细胞也会增强一些自身免疫疾病模型的发展，例如实验性过敏性脑脊髓炎、胶原诱导的关节炎、结肠炎和糖尿病等。在慢性炎症相关的肿瘤生长过程中，IL-23也起到了促进作用。在人体内，当出现一些免疫功能紊乱相关疾病时，IL-23浓度也会显著升高。
本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法(Sandwich ELISA)检测样品中小鼠IL-23的浓度，其原理见图1。小鼠IL-23特异的单克隆捕获抗体已预包被于酶标板上，当加入标准品或样品时，其中的小鼠IL-23会与捕获抗体结合。当加入生物素化的抗小鼠IL-23抗体后，生物素化抗小鼠IL-23抗体与小鼠IL-23结合，形成夹心的免疫复合物。随后加入辣根过氧化物酶标记Streptavidin (HRP-Streptavidin)，由于生物素与链霉亲和素(Streptavidin)可以特异性地结合，因此链霉亲和素连接的HRP就会与夹心的免疫复合物连接起来而被固相捕获。最后加入显色剂TMB溶液，固相捕获的辣根过氧化物酶就会催化无色的显色剂氧化成蓝色物质，在加入终止液后呈黄色。通过酶标仪检测450nm处的吸光度值就能实现定量检测。小鼠IL-23浓度与A450值呈正比，通过绘制标准曲线，对照样品吸光度值，即可计算出样品中小鼠IL-23浓度。

图1. 双抗体夹心ELISA原理图。

一个包装的本试剂盒，包括标准品检测，可以进行96次检测。
包装清单：

保存条件：
标准品4℃保存，1-2周内有效，-20℃保存6个月内有效；试剂盒其它组分4℃保存6个月内有效。除标准品外，试剂盒其它组分严禁冻存。
注意事项：
由于标准品一般是冻干粉，在制备后需要严格校准，所以标准品的瓶数及每瓶标准品所需加入的稀释液体积请以实际收到的试剂盒及标准品标签上的标注为准。
洗涤液(20X)在低温下可能有结晶，如果发现有结晶，请室温水浴加热使结晶完全溶解后再配制工作液。
为保证标准品的精确性，标准品配制使用后，如果有剩余请勿再次使用。
TMB溶液请勿接触氧化剂和金属，否则容易失效。
加样时，请注意每个样品或标准品必须更换枪头，一方面避免交叉污染，另一方面也避免吸取体积的误差。
由于本试剂盒均经过独立测试，所以请勿混用不同货号和不同批次的试剂盒组分，即使是同种试剂盒不同批次的试剂盒组分也不能混用。多个试剂盒同时检测时，请独立使用各个试剂盒中的试剂，请勿使用不同试剂盒中相同名称的组分。
充分混匀对保证反应结果的精准性很重要，在加液后请轻轻晃动整个96孔板，以保证混匀。
本试剂盒很多操作在室温进行，要求严格控制室温在25-28℃。温度低于25℃会导致最终检测到的吸光度显著下降。
洗涤过程非常重要，洗涤不充分会使精确度下降并导致结果误差较大。
检测标准品和样品时建议设置重复孔，以确保检测结果的可信度。
加样过程中须避免气泡的产生。
本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。