碧云天的Human SCF ELISA Kit (Human Stem Cell Factor Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay Kit)，即人干细胞因子酶联免疫吸附检测试剂盒，是一种用于特异性地高灵敏地定量检测人血清、血浆或细胞培养上清液中的SCF的ELISA试剂盒。
本产品检测灵敏度高，特异性强，重复性好。多次重复检测结果表明，最小检出量为13.6pg/ml，与人EGF、Epo、G-CSF、GM-CSF、IL-1α、IL-1β、IL-2、IL-4、IL-6、IL-8、LIF、TGF-β1、TNF-α等均没有交叉反应，板内、板间变异系数均小于10%。
干细胞因子(Stem Cell Factor, SCF)是一种多效性细胞因子。最初人们认为人和小鼠干细胞因子cDNA编码产生包括25个氨基酸残基信号肽、189个氨基酸残基胞外域、23个氨基酸残基跨膜区和36个氨基酸残基胞质域的跨膜蛋白。随后的分析结果显示在小鼠体内由于外显子缺失会产生比正常SCF少28个氨基酸残基的SCF变体。目前证实在人和小鼠体内都存在248个氨基酸的SCF及220个氨基酸的SCF剪切变体，两种变体分子量分别为45kDa (KL-1)和32kDa (KL-2)。两种形式的SCF通过蛋白裂解都能得到游离形式的SCF。无论是游离的SCF还是跨膜SCF都具有生长因子活性。能够产生SCF的细胞主要有成纤维细胞、肝细胞、精原细胞、内皮细胞、神经元细胞、巨噬细胞、卵母细胞、施万细胞、细胞滋养层细胞、复层扁平上皮细胞和多种肿瘤细胞。
天然的游离SCF是一种N或O连接高度糖基化蛋白，通常以非共价键相连的二聚体形式存在，SCF单体中的4个半胱氨酸残基都参与分子间二硫键的形成。利用大肠杆菌重组得到的游离SCF在体外与天然的SCF具有相同的生物学活性，这提示糖基化并非游离SCF发挥活性所必须。无论是小鼠还是大鼠SCF都与人SCF具有高度的同源性，在氨基酸序列上具有约80%的相似性。小鼠SCF和大鼠SCF也都能作用于人源细胞发挥作用，然而人SCF对小鼠或大鼠细胞的作用活性则要低许多。SCF主要在胚胎发育和出生后阶段调节黑色素细胞、原生殖细胞和造血祖细胞活性。SCF还能刺激成熟或未成熟肥大细胞的增殖，刺激巨噬细胞炎症调节因子的分泌。SCF与其它生长因子如IL-3、IL-6、IL-11、GM-CSF、G-CSF和Epo协同作用诱导髓系红细胞系造血祖细胞集落形成。与IL-3共同作用，SCF还能作为多功能(CD34+/4-HCres)干细胞的生长分化因子。在受到高剂量射线辐射时，SCF还能保护人体骨髓祖细胞免受损害。SCF的其他生物活性还与精原细胞增殖 、CD45+B细胞扩增有关。
本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法(Sandwich ELISA)检测样品中人SCF的浓度，其原理见图1。人SCF特异的单克隆捕获抗体已预包被于酶标板上，当加入标准品或样品时，其中的人SCF会与捕获抗体结合。当加入生物素化的抗人SCF抗体后，生物素化抗人SCF抗体与人SCF结合，形成夹心的免疫复合物。随后加入辣根过氧化物酶标记Streptavidin (HRP-Streptavidin)，由于生物素与链霉亲和素(Streptavidin)可以特异性地结合，因此链霉亲和素连接的HRP就会与夹心的免疫复合物连接起来而被固相捕获。最后加入显色剂TMB溶液，固相捕获的辣根过氧化物酶就会催化无色的显色剂氧化成蓝色物质，在加入终止液后呈黄色。通过酶标仪检测450nm处的吸光度值就能实现定量检测。人SCF浓度与A450值呈正比，通过绘制标准曲线，对照样品吸光度值，即可计算出样品中人SCF浓度。

图1. 双抗体夹心ELISA原理图。

一个包装的本试剂盒，包括标准品检测，可以进行96次检测。
包装清单：

产品编号	产品名称	包装
PS820-1	人SCF抗体预包被板	8孔×12条
PS820-2	样品分析缓冲液	5ml
PS820-3	标准品稀释液	10ml
PS820-4	人SCF标准品	2-4瓶
PS820-5	人SCF生物素化抗体	10ml
PS820-6	辣根过氧化物酶标记Streptavidin	10ml
PS820-7	洗涤液(20X)	30ml
PS820-8	TMB溶液	10ml
PS820-9	终止液	5ml
PS820-10	封板膜(透明)	2张
PS820-11	封板膜(白色)	2张
-	说明书	1份

保存条件：
标准品4℃保存，1-2周内有效，-20℃保存6个月内有效；试剂盒其它组分4℃保存6个月内有效。除标准品外，试剂盒其它组分严禁冻存。
注意事项：
由于标准品一般是冻干粉，在制备后需要严格校准，所以标准品的瓶数及每瓶标准品所需加入的稀释液体积请以实际收到的试剂盒及标准品标签上的标注为准。
洗涤液(20X)在低温下可能有结晶，如果发现有结晶，请室温水浴加热使结晶完全溶解后再配制工作液。
为保证标准品的精确性，标准品配制使用后，如果有剩余请勿再次使用。
TMB溶液请勿接触氧化剂和金属，否则容易失效。
加样时，请注意每个样品或标准品必须更换枪头，一方面避免交叉污染，另一方面也避免吸取体积的误差。
由于本试剂盒均经过独立测试，所以请勿混用不同货号和不同批次的试剂盒组分，即使是同种试剂盒不同批次的试剂盒组分也不能混用。多个试剂盒同时检测时，请独立使用各个试剂盒中的试剂，请勿使用不同试剂盒中相同名称的组分。
充分混匀对保证反应结果的精准性很重要，在加液后请轻轻晃动整个96孔板，以保证混匀。
本试剂盒很多操作在室温进行，要求严格控制室温在25-28℃。温度低于25℃会导致最终检测到的吸光度显著下降。
洗涤过程非常重要，洗涤不充分会使精确度下降并导致结果误差较大。
检测标准品和样品时建议设置重复孔，以确保检测结果的可信度。
加样过程中须避免气泡的产生。
本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。